Produkcija fragmentov protiteles v kvasovki Pichia pastoris s kontinuirnim bioprocesomMlakar, David (Avtor) Podgornik, Aleš (Mentor) kemostatPichia pastorisfragment protiteles Fcabafinitetna kromatografijaSDS-PAGEV današnjem času so protitelesa in fragmenti protiteles eni izmed najbolj pogostih in zaželenih biotehnoloških produktov, pri čemer je Pichia pastoris pogosto izbrana kot produkcijski organizem, saj gre za enega bolj preučenih mikroorganizmov z izredno dobrimi lastnostmi za industrijsko produkcijo. Pri načrtovanju bioprocesne sheme se pogosto osredotočamo na podoben vzorec korakov, vendar pa je za vsak proces potrebno razviti celovit, individualen pristop. Pri našem delu smo se zato posvetili individualnemu pristopu optimizacije gojenja kvasovke vrste Pichia pastoris na majhni bioreaktorski skali z namenom produkcije protitelesnih fragmentov Fcab. S spreminjanjem priprave inokuluma in načina inokulacije smo postopek standardizirali, s spreminjanjem pogojev gojenja, kot je stopnja redčenja, pa smo uspešno s kontinuirnim postopkom gojili kulturo, ki je ostala produkcijsko aktivna. Slednje smo dokazali z analizami izolatov produkta z metodo SDS-PAGE. Reverzibilna vezava fragmenta Fcab s proteinom A nam je omogočila uporabo afinitetne kromatografske metode tako za namen njihove izolacije, hkrati pa smo z rezultati lahko ocenili tudi končno koncentracijo produkta v bioreaktorju.[D. Mlakar]20222022-01-22 07:15:39Magistrsko delo/naloga134630UDK: 606:616-097.3:602.4:602.3:582.282.23(043.2)VisID: 203156COBISS_ID: 95344899sl