Proučevanje raznolikosti in živosti glivne združbe na slikah na platnuGajšek, Mitja (Avtor) Zalar, Polona (Mentor) oljne slikebiodeterioracijagliveglivne združbeživostIlluminaqPCRfluorescencamikroskopiranjeOljne slike na platnu shranjene v določenih okoljskih pogojih pogosto napadejo plesni. Številni materiali na slikah predstavljajo za glive uporabne organske snovi, prav tako lahko glive rastejo na platnu. Najpomembnejši omejujoč okoljski dejavnik za rast gliv je stalno omejena dostopnost vode. V magistrski nalogi smo preučevali glive na štirih plesnivih slikah na platnu naslikanih z oljnimi barvami, stare od 265 do 504 let, vse iz slovenskih cerkva. Z uporabo klasičnih gojitvenih tehnik smo določali gostoto celic na vzorčenih površinah in osamili čiste kulture gliv, ki smo jih na podlagi molekularnih markerjev identificirali do vrst. Gojitveni in molekularni pristop (sekvenciranje kratkih odčitkov ITS2 okoljske DNA) sta podala podoben rezultat z manjšimi odstopanji; na slikah so prevladovale kserofilne vrste rodu Aspergillus in kserotolerantne vrste rodov Penicillium in Cladosporium. Odvzete odtise površin slik na posebne lepilne trakove smo barvali z različnimi seti fluorescentnih barvil za določanje živosti celic. Ugotovili smo, da je delež mrtvih gliv na odtisih visok in da se spore barvajo nespecifično. Da bi ugotovili vrste in delež živih gliv na slikah, smo uporabili kvantitativno verižno reakcijo s polimerazo v realnem času (qPCR) in sekvenciranje kratkih odčitkov pomnožkov ITS2 na vzorcih, obdelanih s fotoreaktivnim barvilom propidijevim monazidom. Le-to onemogoča pomnoževanje DNA mrtvih celic v PCR reakciji. Na čistih kulturah smo dokazali, da barvilo PMAxx v končni koncentraciji 25 μM deluje pri tretiranju gliv in da se ga lahko uporabi pri ostalih visokozmogljivih genetskih metodah.[M. Gajšek]20212021-09-26 07:15:44Magistrsko delo/naloga131379UDK: 579.24+579.26:582.28:75.025VisID: 198743COBISS_ID: 77976579sl