Imobilizacija transaminaz na prepletena nanovlakna v mikroreaktorjihŠketa, Borut (Avtor) Žnidaršič Plazl, Polona (Mentor) imobilizacijaamin transaminazamikropretočni sistemibiotransformacijaEncimska kataliza omogoča izvedbo enantioselektivnih reakcij pri nizkih temperaturah, blagem pH in atmosferskem tlaku. Kljub tem prednostim pa je za ekonomsko upravičenost biokatalitskih procesov v industriji ključna imobilizacija encimov. Ta zagotovi manjše izgube dragih encimov, hkrati pa lahko izboljša njihovo stabilnost in odpornost v pogojih industrijskih procesov, ki zelo odstopajo od naravnega okolja encimov. Izvedba biokatalitskih procesov v mikropretočnih sistemih, ki zaradi dobre regulacije temperature, prenosa snovi in majhnega volumna omogočajo visoke konverzije ob majhnih količinah porabljenih topil ter nastalih stranskih produktov, hkrati pa nudijo možnost kontinuirnega delovanja, v zadnjem času zavzema vse več pozornosti. Prepletena nanovlakna predstavljajo prilagodljiv nosilec za imobilizacijo encimov v mikroreaktorje. Imajo veliko specifično površino z možnostjo funkcionalizacije, obenem pa zaradi velike poroznosti omogočajo skoraj nemoten transport snovi. V pričujočem delu smo izrazili in izolirali več amin transaminaz s heksahistidinskm (His6) označevalcem na različnih koncih proteina in brez njega ter primerjali njihovo imobilizacijo na prepletenih nanovlaknih z različnimi funkcionalnimi skupinami. Na nanovlaknih, na katere se je transaminaza vezala kovalentno, smo opazili veliko izgubo aktivnosti, medtem ko je koordinativna vezava preko His6 označevalca zadržala največ prvotne encimske aktivnosti. Poleg tega smo na izbranih prepletenih nanovlaknih uspešno izvedli koimobilizacijo kofaktorja encima.20212021-09-23 13:05:00Magistrsko delo/naloga131190VisID: 17161COBISS_ID: 86441731sl