Vpliv ukinjenega izločanja laktata pri rakastih celicah na njihovo uničevanje z aktiviranimi limfociti TMarolt, Nika (Avtor) Legiša, Matic (Mentor) Aktivirani limfociti TCaco-2Colo289Jurkatko-kulturaMDA-MB-231rak6-fosfofrukto-1-kinazaVisoko aktiven modificiran encim 6-fosfofrukto-1-kinaze (PFK1), povzroči deregulacijo glikolize in predstavlja glavni metabolni motor hitre rasti rakastih celic. Zaradi prekomernega pretoka metabolitov nastaja tudi višek NADH v citosolu, ki prispeva h povečani tvorbi rekativnih kisikovih zvrsti, ki so izredno reaktivne in povzročajo mutacije ter spremenjeno celično signalizacijo rakastih celic. Testirali smo učinkovitost triintrideset specifičnih PFK1 inhibitorjev za zniževanje tvorbe reaktivnih kisikovih zvrsti pri rakastih celicah in nato izmed njih, izbrali najbolj učinkovite, s katerimi smo izvedli koncentracijsko odvisne teste. Uporabili smo tumorigene celične linije Caco-2, Colo 289, MDA-MB-231 in Jurkat. Pri tem smo ugotovili različne učinkovitosti izbranih PFK1 inhibitorjev pri testiranih celičnih linijah. Povišana tvorba NADH, ki se reoksidira ob redukciji piruvata v laktat, kot posledica povišanega pretoka skozi glikolizo, vodi v povišano sekrecijo laktata iz rakastih celic. Izvencelični laktat povzroča acidifikacijo v tumorjih in predstavlja glavni zaviralec učinkovitosti imunskih celic proti rakastim. S testom ko-kulture tumorigenih celic Jurkat in aktiviranih T limfocitov, smo na pretočnem citometru izmerili višji odstotek apoptoze pri tumorigenih celicah Jurkat, ki so bile tretirane s specifičnim PFK1 inhibitorjem (I3, I23 in I29) v primerjavi z kontrolo. Rezultati nakazujejo, da je tretiranje rakastih celic z izbranimi PFK1 inhibitorji, omogočilo aktiviranim T limfocitom bolj učinkovito uničevanje rakastih celic v primerjavi z netretiranimi rakastimi celicami. Učinkovite testirane PFK1 inhibitorje bi bilo smiselno uporabiti v nadaljnjih raziskavah, saj predstavljajo potencialna zdravila za tretiranje bolezni kot je rak.[N. Marolt]20212021-09-11 07:16:06Magistrsko delo/naloga130181UDK: 606:616-006.6:601.2:577.121:577.27(043.2)VisID: 195883COBISS_ID: 76571395sl