Ugotavljanje korelacije med trdnostjo celic in mutacijami v keratinih v človeških keratinocitihSorčan, Tjaša (Avtor) Rozman, Damjana (Mentor) epidermiskeratinocitibulozna epidermoliza simplekskeratin 14agregatiKeratinski filamenti so glavni strukturni element v epitelijskih celicah. V celicah vzdržujejo obliko in trdnost ter zagotavljajo fizično odpornost na mehanske obremenitve. Opisanih je bilo več različnih mutacij v keratinih, ki vodijo v različne tipe bolezni. Za mutacije v keratinih 5 in 14 je znano, da povzročijo nastanek bulozne epidermolize simpleks (EBS), bolezni krhkosti kože. V magistrskem delu smo preučevali točkovno mutacijo K14 R125P, ki povzroča hudo obliko EBS. Tipičen fenotipski pojav ob mutaciji je nastanek agregatov, ki pa še ni natančno razložen. Z uporabo optične pincete smo določili togost keratinocitov z vstavljenim konstruktom dodatne kopije K14, z mutacijo R125P, za različne količine mutiranega keratina. Ugotovili smo, da se razlika v togosti pojavi zgolj pri celicah z najnižjim deležem mutiranega keratina, pri katerih smo opazili tudi največ celic z agregati. Agregati so dinamičen organel, ki ga celica lahko reciklira s pomočjo proteosomalnega sistema, kot smo dokazali z njegovo inhibicijo in prenosom po Westernu. Z matematičnim modeliranjem smo razložili tudi nastanek agregatov – z asimetrično vezavo, pri kateri sodelujeta tako keratin divjega tipa kot mutirani keratin, kasneje pa agregati rastejo ob dodajanju predvsem mutiranega keratina.20212021-09-09 10:30:00Magistrsko delo/naloga129939VisID: 6869COBISS_ID: 82715907sl