Funkcionalizacija monodisperznih delcev silicijevega dioksida s koronavirusnima proteinoma ORF8 in NŽerjav, Neža (Avtor) Gunčar, Gregor (Mentor) SARS-CoV-2silicijev dioksidnanodelcifunkcionalizacijaVirus SARS-CoV-2 je predstavnik koronavirusov, ki se je pojavil konec leta 2019 in povzročil pandemijo covida-19. Monodiperzni delci silicijevega dioksida v raztopinah kažejo zanimive optične lastnosti, ki so uporabne pri izdelavi biosenzorja, s katerim bi lahko zaznali prisotnost virusa. Eden izmed korakov pri izdelavi biosenzorja je tudi funkcionalizacija delcev z molekulami, ki omogočajo zaznavanje tarčnih biomolekul. V diplomskem delu smo se osredotočili na njegov strukturni protein N in pomožni protein ORF8. Oba interagirata z imunskim sistemom gostitelja in sta močno imunogena. Proteina smo izrazili v bakterijskem sistemu E. coli BL21[DE3]. Iz topne frakcije smo s pomočjo nikljeve afinitetne kromatografije uspeli izolirati le protein N, ki smo mu nato s proteazo TEV odcepili heksahistidinsko oznako in ga dodatno skoncentrirali. Z njim smo funkcionalizirali monodisperzne delce SiO2, ki smo jih sintetizirali na dva različna načina in predhodno aktivirali z aldehidnimi funkcionalnimi skupinami. Pokazali smo, da se je protein vezal na delce, vendar zaradi prevelike občutljivosti testa, s katerim smo preverjali uspešnost funkcionalizacije, nismo uspeli nedvoumno dokazati, da je kovalentna vezava bolj učinkovita od adsorpcije.20212021-08-30 13:05:00Diplomsko delo/naloga129218VisID: 19461COBISS_ID: 75977219sl