Elementarni dogodki eksocitoze in endocitoze v aktiviranih astrocitih v kulturiBožić, Mićo (Avtor) Stenovec, Matjaž (Mentor) Zorec, Robert (Komentor) astrocitieksocitozaendocitozaaktivacija astrocitovIFNγMHCIIpredstavitev antigenovserumelektrofiziologijameritve kapacitivnostiAstrociti so homeostatične celice centralnega živčevja, ki se odzivajo na patološke dražljaje s procesom aktivacije. Vnetni citokin interferon γ (IFNγ) v astrocitih inducira izražanje molekul poglavitnega histokompatibilnostnega kompleksa razreda II (MHCII), ki so potrebne za predstavitev antigenov. Izolirane astrocite tradicionalno gojimo v celični kulturi s serumom, ki poveča bazalno raven aktivacije in spremeni njihovo morfologijo ter znotrajcelično signalizacijo s kalcijevimi ioni. Vpliv obeh prožilcev aktivacije astrocitov na elementarne dogodke ekso-/endocitoze v astrocitih je nepoznan. V delu smo zato raziskali dinamiko in lastnosti elementarnih dogodkov ekso-/endocitoze v podganjih netretiranih serumskih astrocitih, serumskih astrocitih, tretiranih z IFNγ in astrocitih v brezserumski kulturi. Znotrajcelično porazdelitev imunofluorescenčno označenih molekul MHCII smo analizirali s konfokalno mikroskopijo in mikroskopijo s strukturirano osvetlitvijo, lastnosti elementarnih dogodkov ekso-/endocitoze smo raziskali z meritvami membranske kapacitivnosti z metodo vpete napetosti krpice membrane. V astrocitih, tretiranih z IFNγ, so se molekule MHCII lokalizirale pretežno v pozne endo-/lizosome, vendar so dosegle tudi plazmalemo. Z njo so prehodno interagirali večji eksocitotski mešički, medtem ko so bili inhibirani dogodki popolne endocitoze. Ekso-/endocitotska dejavnost brezserumskih astrocitov je bila primerljiva z dejavnostjo serumskih astrocitov v spontanih razmerah, medtem ko je bil zavrt njihov ekso-/endocitotski odziv na draženje z ATP. Aktivacija astrocitov v kulturi z IFNγ ali serumom spremeni dinamiko elementarnih dogodkov ekso-/endocitoze in podaljša zadrževanje molekul MHCII na površini.20202020-12-31 07:15:21Doktorsko delo/naloga124106VisID: 187597COBISS_ID: 49776643sl