Razvoj nedestruktivnih pristopov za prepoznavo spola močerila (Proteus anguinus, Urodela, Amphibia)Gredar, Tajda (Avtor) Kostanjšek, Rok (Mentor) Bizjak Mali, Lilijana (Komentor) prepoznava spolaProteus anguinusvitelogeninspolni steroidni hormonispolno specifični markerjikloakaoocitiPrepoznava spola pri jamski repati dvoživki močeril (Proteus anguinus) je otežena zaradi odsotnosti spolnega dimorfizma in homomorfnih spolnih kromosomov. Namen naloge je bil razvoj nedestruktivnega in zanesljivega pristopa prepoznave spola na podlagi analize (i) spolno specifičnih genetskih markerjev z verižno reakcijo s polimerazo, (ii) proteina vitelogenina (Vtg) s poliakrilamidno gelsko elektroforezo v prisotnosti natrijevega dodecil sulfata ter (iii) hormonov testosterona (T) in 17-β-estradiola (E2) in njunih metabolitov z encimskoimunskimi testi. Rezultate omenjenih analiz smo delno ovrednotili s histološko analizo gonad. Ugotavljamo, da samice prepoznamo, ko se koncentracija E2 v krvi zviša nad 450 pg/ml, detekcija Vtg v krvni plazmi pa omogoča prepoznavo vitelogene stopnje oogeneze. Vtg zaznamo po postopnem večmesečnem zviševanju E2, čemur sledi tudi vidna zaznava oocitov skozi trebušno steno. Z večkratnimi meritvami E2 in Vtg v krvni plazmi samic smo potrdili zoritev oocitov, nepričakovano znižanje E2 in Vtg med oogenezo pa sovpada z degeneracijo oocitov, kar potrjuje tudi zmanjšanje velikosti in števila vidnih oocitov. Samce prepoznamo, ko se koncentracija T v krvi zviša nad 450 pg/ml, zvišanje T v krvi pa sovpada z zadebelitvijo kloake. Kljub temu izgled kloake ni zanesljiv znak za prepoznavo spola. Analize T in E2 v sluzi ter njunih metabolitov v iztrebkih z uporabljenimi postopki niso bile uspešne, prav tako Vtg nismo zasledili v sluzi in homogenatih jeter ter jajčnikov. Genetskih spolno specifičnih markerjev, ki so poznani pri nekaterih dvoživkah, pri močerilu nismo potrdili. Razviti pristopi sicer ne omogočajo prepoznave spola živali izven obdobja aktivne gametogeneze, vendar bodo pomembno orodje za namen razmnoževanja močerilov v ujetništvu.20202020-12-24 07:15:51Doktorsko delo/naloga124066VisID: 187587COBISS_ID: 49783555sl