Optimizacija zamrzovanja celic ovarija kitajskega hrčkaDorn, Romana (Avtor) Narat, Mojca (Mentor) Vatovec, Sabina (Komentor) celične bankezamrzovanjesesalske celiceoptimizacijaCHOkrioprotektantiDMSOCelice ovarija kitajskega hrčka se v farmacevtski industriji pogosto uporabljajo za proizvodnjo biofarmacevtskih učinkovin. Del procesa je proizvodnja celičnih bank, kjer se celice pripravi na zamrzovanje in dolgotrajno shranjevanje na ultra nizki temperaturi. Tako shranjene celice so po odtaljevanju v dobrem stanju in ohranjajo lastnosti celične linije. Zaradi tvorbe ledu med procesom zamrzovanja ali odtaljevanja lahko pride do poškodb celic, kar lahko vodi v nižjo viabilnost celic po odtaljevanju. Nastanek poškodb lahko preprečimo z dodatkom krioprotektantov, ki pa so lahko za celice po določenem času izpostavljenosti in koncentraciji toksični. V magistrski nalogi smo testirali različne koncentracije krioprotektanta DMSO, čase izpostavljenosti krioprotektantu pred zamrzovanjem ter temperaturo priprave zamrzovalne suspenzije z namenom optimizacije zamrzovanja. Testirali smo tudi, ali so ti dejavniki vplivali na titer produkta ob koncu bioprocesa z dohranjevanjem. Zaradi izpostavljenosti različnim temperaturam med rokovanjem s kriovialami smo testirali tudi učinke različnih temperatur na nekaterih celičnih linijah, shranjenih pri ultra nizki temperaturi. Ugotovili smo, da celice dosežejo višjo viabilnost, če pripravimo zamrzovalno suspenzijo pri hladnih pogojih. Nizka temperatura omogoča tudi daljši čas izpostavljenost celic krioprotektantu. Učinek različnih temperatur med rokovanjem s kriovialami na dolgotrajno shranjene celice je specifičen za celično linijo.[R. Dorn]20202020-10-03 07:15:43Magistrsko delo/naloga121297UDK: 606:62:57.086.13(043.2)VisID: 183584COBISS_ID: 32335619sl