Določanje humanega prionskega proteina PrP226* v krviPucko, Rok (Avtor) Čurin Šerbec, Vladka (Mentor) Prionski proteinPrP226*biomarkerdoločanjeELISAheterofilna protitelesaCelični prionski protein (PrPC) je glikoprotein. V telesu ima več bioloških funkcij, med katerimi so celična adhezija, medcelična signalizacija, vzdrževanje ionske homeostaze in zaščita nevronov. Povezujemo ga tudi z nastankom nevrodegenerativnih bolezni. Po cepitvi PrPC s proteazo ADAM 10 nastane odcepljena oblika PrP brez GPI-sidra. Ta prosto plava po telesnih tekočinah in se veže na PrPSc agregate ter preprečuje njihovo pomnoževanje. Povod za razvoj nevrodegenerativnih bolezni pa je lahko situacija, ko PrPSc agregati vežejo PrPC in se ta pretvori v PrPSc, ki ga potem ADAM 10 sprosti iz membrane. Zaradi te lastnosti se osredotočamo na določanje skrajšane oblike PrP v krvi, s poudarkom na PrP226*, ki je izjemen biomarker za diagnozo prionskih bolezni. Namen dela je bil izdelati zanesljiv presejalni test ELISA za določanje prisotnosti skrajšane oblike PrP (PrP226*) v vzorcih plazme krvodajalcev z uporabo mAb V5B2 kot lovilnega protitelesa ter uporabo mAb E12/2 kot detekcijskega protitelesa. Določili smo občutljivost testa, nato smo testirali 484 vzorcev plazme krvodajalcev. Po presejalnem testiranju smo ugotovili, da zaradi prisotnosti heterofilnih protiteles (HA) dobivamo lažno pozitivne rezultate. Prisotnost HA v vzorcu smo potrdili z uporabo komercialno dostopnih protiteles. Z različnimi metodami smo nato iz vzorca poskušali izločiti HA.[R. Pucko]20202020-09-19 07:15:04Magistrsko delo/naloga120377UDK: 606:61:57.083.3:602.44:547.963.1(043.2)VisID: 181101COBISS_ID: 32311555sl