Nevtralizacija dabigatrana z idarucizumabom v pogojih in vitroKrivec, Mojca (Avtor) Božič Mijovski, Mojca (Mentor) Dabigatran Idarucizumab Test tvorjenje trombina Presejalne koagulacijske preiskave (APTČPČ in TČ)Neposredna peroralna antikoagulacijska zdravila (NO-AK) med katere sodi neposredni zaviralec trombina dabigatran (Pradaxa®), imajo številne prednosti pred antagonisti vitamina K, kot so manj številne interakcije z zdravili in hrano, širše terapevtsko okno, kar omogoča fiksni odmerek zdravila in s tem odsotnost potrebe po rednem laboratorijskem nadzoru. Prednost dabigatrana pred antagonisti vitamina K predstavlja tudi obstoj specifičnega antidota idarucizumaba (Praxbind®), ki veže dabigatran z bistveno večjo afiniteto kot trombin in na ta način zelo hitro izniči antikoagulacijski (AK) učinek zdravila. V raziskavo smo vključili 44 preiskovancev z atrijsko fibrilacijo (AF), ki so prejemali dabigatran. Vsem preiskovancem smo vzeli vzorec krvi pred in med uvedbo AK terapije, katerim smo nato dodali idarucizumab in vitro. Učinek dabigatrana in dodatka idarucizumaba in vitro smo preverjali s pomočjo presejalnih koagulacijskih preiskav (PČ, APTČ in TČ) ter s pomočjo spremljanja tvorjenja trombina (ang. Thrombin generation assays, TGA). Pri tem smo ugotovili, da so vrednosti APTČ, faza mirovanja ter čas do trombinskega vrha naraščale z višanjem koncentracije dabigatrana v plazmi preiskovancev v primerjavi z vzorci pred AK terapijo. Dabigatran ni imel nobenega statističnega vpliva na trombinski vrh. Vrednost PČ (%) se je statistično zmanjšala, prav tako površina pod krivuljo, zaradi zaviralnega učinka dabigatrana na trombin v primerjavi z vzorci pred AK terapijo. Z dodatkom idarucizumaba in vitro smo omogočili nevtralizacijo AK učinka dabigatrana, kar smo dokazali z normalizacijo PČ, APTČ, TČ, faze mirovanja in časa do trombinskega vrha, medtem, ko sta spremenljivki trombinski vrh in površina pod krivuljo ostali zvišani v primerjavi z vzorci, odvzeti pred AK terapijo.V raziskavi smo dokazali, da vzorci odvzeti v času AK terapije, ki vsebujejo dabigatran zaradi zaviralnega učinka na trombin podaljšuje APTČ, fazo mirovanja in čas do trombinskega vrha, ki jih z dodatkom idarucizumaba in vitro ne le popolnoma nevtraliziramo, ampak tudi statistično znižamo v primerjavi z vzorci pred AK terapijo. Podobne rezultate smo dobili tudi pri spremenljivkah tvorjenja trombina, razen pri času trombinskga vrha in površini pod krivuljo, ki sta ob prisotnosti dabigatrana statistično višji v primerjavi z vzorci pred AK terapijo in sta neučinkovita pri prepoznavanju AK učinka dabigatrana. Trombinski vrh in površina pod krivuljo sta ostala nespremenjena tudi po dodatku idarucizumaba in vitro, kar smo pripisali nastanku kompleksa (α2-makroglobulin-trombin), ki nastaja med tvorjenjem trombina in prispeva k cepitvi fluorogenega substrata in s tem posledično lažno zvišuje rezultate.20202020-09-12 08:45:17Magistrsko delo/naloga119872VisID: 75446sl