Vpliv izbranih inhibitorjev tirozinskih kinaz na genomsko stabilnost ribjih jetrnih celic ZFL in vitroKrapež, Maša (Avtor) Žegura, Bojana (Mentor) Novak , Matjaž (Komentor) tirozin kinazni inhibitorjiTKIne-tarčni organizmiodpadne vodecitotoksičnostgenotoksičnosterlotinibsorafenibregorafenibdasatinibimatinib mezilatnilotinibDanio reriojetrne celice rib cebriccelice ZFLpretočna citometrijatest mikrojederTirozin kinazni inhibitorji (TKI-ji) so majhne molekule za tarčno zdravljenje rakavih celic. Po zaužitju se TKI-ji izločijo preko fekalij in urina v vodno okolje ter imajo morebitne škodljive učinke na ne-tarčne organizme, ki v takem okolju živijo. V magistrski nalogi smo raziskovali citotoksično in genotoksično delovanje šestih TKI-jev: erlotiniba (ERL), sorafeniba (SOR), regorafeniba (REG), dasatiniba (DAS), imatinib mezilata (IM) in nilotiniba (NIL) na in vitro modelu jetrnih celic rib cebric (Danio rerio; ZFL). Citotoksičnost smo raziskovali z barvanjem celic s propidijevim jodidom in pretočno citometrijo, vpliv na celični cikel z barvanjem s Hoechst 33342 in pretočno citometrijo, vpliv na genomsko stabilnost pa z dvema različicama testa mikrojeder, in sicer s testom mikrojeder s pretočno citometrijo ter testom mikrojeder z ustavitvijo citokineze. Celice ZFL so bile v vseh poskusih TKI-jem izpostavljene 72 ur pri različnih koncentracijah posameznega TKI-ja. Pri testu mikrojeder z ustavitvijo citokineze, s katerim smo potrjevali rezultate dobljene s testom mikrojeder s pretočno citometrijo, so bile celice TKI-jem izpostavljene le eni koncentraciji. Rezultati so pokazali, da so določeni TKI-ji, in sicer SOR (4 µM), DAS (0,015, 0,03 in 0,06 µM) in NIL (5, 10 in 20 µM) značilno vplivali na živost celic ZFL. Po 72 urah izpostavitve TKI-ji niso značilno vplivali na celični cikel celic ZFL kot tudi ne na genomsko stabilnost celic ZFL pri pogojih izpostavitve. Slednje smo potrdili tudi s klasično metodo testa mikrojeder z ustavitvijo citokineze. Noben izmed proučevanih TKI-jev ni značilno vplival na število mikrojeder, nukleoplaznmatskih mostičkov in jedrnih brstov, medtem ko so na jedrni delitveni indeks značilno vplivali SOR (4 µM), REG (3 µM) ter NIL (20 µM).20202020-07-26 07:16:05Magistrsko delo/naloga117790VisID: 176573COBISS_ID: 26721539sl