Optimizacija produkcije in izolacije plazmidne DNA za gensko terapijoVolk, Manca (Avtor) Petrovič, Uroš (Mentor) Peterka, Matjaž (Komentor) plazmidna DNAgenska terapijapridobivanje plazmidne DNAoptimizacija bioprocesaPridobivanje plazmidnih vektorjev za uporabo v genski terapiji je odvisno od donosnosti pridobivanja, ki mora zagotoviti zadostne količine plazmidne DNA v obliki kovalentno zaprtega kroga. Na količino in kakovost plazmidne DNA v zaključnih procesih vpliva več dejavnikov, ki jih je potrebno optimizirati v začetnih, pripravljalnih fazah bioprocesa. Z namenom povišanja donosnosti bioprocesa smo v sklopu magistrske naloge optimizirali pripravljalni proces. Z gojenjem smo pričeli v 3-litrskem bioreaktorskem sistemu, kjer smo lahko tekom gojenja spremljali rast, parcialni tlak kisika ter pH v kontroliranem okolju. Gojenje smo najprej izvedli v šaržu brez dohranjevanja in kasneje v šaržu z dohranjevanjem. Testirali smo vpliv parcialnega tlaka kisika ter temperature na količino plazmidne DNA. Z uporabo šaržnega gojenja z dohranjevanjem smo dosegli 79,5 % višji donos plazmidne DNA v primerjavi s šaržnim gojenjem brez dohranjevanja.20202020-05-15 07:15:04Magistrsko delo/naloga116106VisID: 175811COBISS_ID: 19055363sl