Odziv kvasovk vrste Saccharomyces cerevisiae na tvorbo agregatov proteina TDP-43.Jug, Blaž (Avtor) Jamnik, Polona (Mentor) Dogša, Iztok (Komentor) Saccharomyces cerevisiaeTDP-43ALSagregatistresKvasovke Saccharomyces cerevisiae imajo pomembno vlogo kot modelni organizem za razumevanje razvoja različnih nevrodegenerativnih bolezni. Prav njihova enostavnost za kultivacijo in zadostna podobnost celicam sesalcev sta pripomogla k njihovi splošni uporabi pri različnih znanstvenih študijah. Nevrodegenerativne bolezni predstavljajo težavo in izziv modernega časa, saj so rezultat staranja populacije in podaljševanja življenjske dobe ljudi. Med redke nevrodegenerativne bolezni prištevamo amiotrofično lateralno sklerozo (ALS). Prizadene motorične nevrone v možganih in hrbtenjači ter povzroči njihovo degeneracijo s citoplazemskimi agregati proteina TDP-43. Cilj naloge je bil preučiti odziv kvasovk na prisotnost citotoksičnih agregatov proteina TDP-43-GFP. Kvasovke, ki smo jih gojili v zaporednih šaržnih kultivacijah, smo opazovali s pomočjo fluorescenčne mikroskopije v različnih fazah rasti. Hkrati smo merili fluorescenčno intenziteto za indikacijo izražanja vstavljenega humanega gena TDP-43-GFP, prirast biomase za vpliv agregatov na celično rast in razmnoževanje ter metabolno aktivnost celic kot odraz energijskih potreb za celični stresni odziv na prisotnost agregatov. Z eksperimenti smo razbrali stresni vpliv agregatov na celice in posledično njihov odziv. Ugotovili smo, da je kultura, ki je bila prvotno kultivirana v ekspresijskem ter nato v represijskem gojišču, ob ponovni kultivaciji v ekspresijskem gojišču po 8 urah kultivacije boljše pripravljena na agregacijski stres. To je razvidno kot povišana celična metabolna aktivnost ter zmanjšanje izražanja gena TDP-43 za polovico v primerjavi z ekspresijsko kulturo prve kultivacije. Naši rezultati bi lahko pomembno pripomogli k razumevanju razvoja ALS pri nastanku in odstranitvi agregatov proteina TDP-43.[B. Jug]20202020-03-06 07:15:04Magistrsko delo/naloga114721UDK: 602.3:582.282.23:606:616.8(043.2)VisID: 175733COBISS_ID: 9436537sl