Izražanje izbranih genov za virulentne dejavnike bakterije Escherichia coliZugan, Maja (Avtor) Žgur Bertok, Darja (Mentor) Escherichia colihemolizinfimbrijeaerobaktinizražanje genovheterogenostfluorescencaUropatogene Escherichia coli (UPEC) povzročajo okužbe sečil. Ključno vlogo pri tem imajo virulentni dejavniki, med katerimi najpogosteje zasledimo fimbrije, toksin hemolizin ter sisteme za privzem železa. Izražanje genov za virulentne dejavnike bi lahko bilo podvrženo heterogenosti, pojavu ki ga zasledimo v populaciji genetsko enakih celic in je posledica okoljskih dejavnikov, ki vplivajo na razlike v translaciji, transkripciji in topologiji DNA. Da bi natančneje preučili izražanje genov za virulentne dejavnike na ravni posameznih celic, smo na plazmidnem vektorju pBAC, spojili promotorje genov za fimbrije tipa 1 (fimA), ? hemolizina (hlyA) in za kelator železa, aerobaktin (iucD) z genom za fluorescentni protein Gfp brez lastnega promotorja. Na izražanje preiskovanih promotorjev smo s fluorescentno mikroskopijo spremljali vpliv hranil, pomanjkanja železa, pH in rast na trdni podlagi. Ugotovili smo, da sta se promotorja genov iucD in hlyA izražala v višji meri na minimalnem gojišču s kelatorjem železa dipiridilom, medtem ko smo za promotor gena za fimbrije fimA pokazali višjo raven izražanja v hranilnem gojišču LB. Izražanje vseh treh preiskovanih promotorjev je bilo načeloma homogeno, vendar smo zasledili primer heterogenega izražanja promotorja iucD v pogojih, ko izražanje sicer ni bilo inducirano.[M. Zugan]20192019-09-04 07:45:42Magistrsko delo/naloga109485UDK: 579.25:579.842.1/.2:577.2VisID: 167161COBISS_ID: 5088888sl