Načrtovanje cepljenega superantigena za imunoterapijo rakaGolob Urbanc, Anja (Avtor) Jerala, Roman (Mentor) superantigencepljeni proteiniprotitelesaaktivacija celic Timunoterapija rakaaktivacija limfocitovantigeni novotvorbproteinski inženiringnovotvorbevezava proteinovT-limfocitimonoklonska protitelesabiokemijaTerapevtska monoklonska protitelesa se uporabljajo za zdravljenje različnih rakavih obolenj, hkrati pa se njihov proti tumorski učinek lahko še izboljša z dodatkom efektorskih molekul, kot so na primer superantigeni (SAg). Superantigeni so bakterijski ali virusni toksini s sposobnostjo aktivacije velikega števila celic T. Njihova bistvena lastnost je, da se vežejo neposredno na poglavitni kompleks tkivne skladnosti razreda II (MHCII), izražen na antigen predstavitvenih celicah, kar vodi v aktivacijo celic T preko celičnega receptorja T (TCR). Ena izmed pomanjkljivosti terapevtske uporabe superantigenov, spojenih s protitelesi, specifičnimi za tumorske antigene, je sistemska aktivacija T-celičnega odziva, ki je posledica visoke afinitete superantigena do kompleksa MHCII. Naša ideja je bila razdeliti superantigen stafilokokni enterotoksin A (SEA) iz Staphylococcus aureus na dva neaktivna fragmenta, ki se sestavita v biološko aktivno obliko le, ko prideta v neposredno bližino. V študiji smo vzpostavili hitro in enostavno metodo za odkrivanje učinkovitih cepljenih različic superantigena, ki temelji na spojitvi fragmentov SEA s peptidi, ki tvorijo obvite vijačnice. Potrdili smo, da je superantigen SEA mogoče razdeliti na dva neaktivna fragmenta, ki se spontano ne sestavita v biološko aktivno obliko, ampak ju morata peptida, ki tvorita heterodimer, pripeljati v neposredno bližino. Kot dokaz principa uporabe za namene imunoterapije raka smo učinkovito različico cepljenega SEA spojili z enoverižnim variabilnim fragmentom monoklonskega protitelesa proti antigenu CD20 (scFv-CD20). Potrdili smo, da sta fragmenta SEA le ob vezavi na tarčni antigen CD20 preko scFv-CD20, dovolj blizu skupaj, da se sestavita v biološko aktivno obliko, ki aktivira limfocite T. Fuzijski proteini, pripravljeni v doktorskem delu, imajo potencialno terapevtsko vrednost za zdravljenje rakavih obolenj, saj smo potrdili, da je njihovo delovanje usmerjeno le proti tumorskim celicam, brez vpliva na netarčne celice.20192019-06-11 11:15:11Doktorsko delo/naloga108009VisID: 11612COBISS_ID: 300696832sl