Pomen anafilaktičnih faktorjev in CCL2 za migracijo bazofilcev.Rihar, Maruša (Avtor) Oven, Irena (Mentor) Koren, Ana (Komentor) imunologijabazofilcimigracijaanafilaksijakemokiniCCL2Anafilaksija je resna preobčutljivostna reakcija, ki nastane v minutah po ponovnem kontaktu z alergenom in lahko povzroči tudi smrt. Glavne efektorske celice anafilaksije so mastociti in bazofilci. Oboji na površini izražajo visoko afinitetni receptor za IgE (FcεRI). Nedavne raziskave so pokazale, da med anafilaksijo bazofilci migrirajo iz krvi v tkivo, pri čemer naj bi imel ključno vlogo kemokin CCL2. Namen naše raziskave je bil določiti vpliv anafilaktičnih faktorjev in CCL2 v serumih bolnikov na migracijo bazofilcev in vitro. V raziskavo smo vključili zdrave darovalce, pri katerih smo z negativno imunomagnetno selekcijo iz krvi izolirali bazofilce. V poskusih migracije smo uporabili parne vzorce serumov bolnikov med anafilaktično reakcijo in po njej. Migracija bazofilcev je potekala v prilagojenih Boydenovih komorah pri 37 °C in 5 % CO2. Za blokado CCL2 smo uporabili nevtralizacijsko protitelo anti-CCL2. Analiza števila in aktivacije bazofilcev je potekala na pretočnem citometru. Rezultati raziskave so pokazali, da je za proučevanje migracije bazofilcev, kjer spremljamo tudi njihovo aktivacijo, ustreznejša uporaba bazofilcev, izoliranih iz heparinizirane krvi kot iz krvi, zbrane v EDTA. Serum bolnikov z anafilaksijo vsebuje faktorje, ki vplivajo na povečano migracijo bazofilcev in vitro. Z modelom migracije bazofilcev proti serumu nismo uspeli potrditi, da inaktivacija CCL2 v serumu vpliva na znižano migracijo. Rekombinantni CCL2 (rCCL2) v raztopini vpliva na povečano migracijo bazofilcev, blokada rCCL2 z anti-CCL2 pa jo zmanjša. Potrebne so dodatne raziskave, ki bodo potrdile natančno vlogo in vir CCL2 pri anafilaksiji.[M. Rihar]20182018-09-13 07:47:30Magistrsko delo/naloga103058UDK: 577.27(043.2)VisID: 155834COBISS_ID: 9045625sl