Lastnosti egerolizina bakterije Spirosoma lingualeSnoj, Jaka (Avtor) Butala, Matej (Mentor) egerolizinmembranski toksininsekticidSpirosoma lingualeEgerolizini so družina majhnih (13-20 kDa) β-strukturiranih proteinov, ki jih najdemo pri predstavnikih evkariontov in prokariontov. Večina egerolizinov interagira z membranskimi lipidi, pri določenih pa so odkrili lastnost porotvornosti v interakciji s proteinskim partnerjem. Bakterije, ki imajo v operonu poleg gena za egerolizin še gen za protein, ki intreragira z egerolizinom, izkazujejo insekticidne lastnosti. Ena izmed bakterij, pri kateri so zasledili operon z genom za egerolizin in z genom za protein, ki domnevno tvori insekticidni kompleks, je bakterija Spirosoma linguale. Namen mojega magistrskega dela je bil pridobiti rekombinantni egerolizin SlinAg in protein SlinB, ki imata gena na skupnem operonu bakterije S. linguale. Izolirana proteina nam omogočita karakterizacijo interakcije teh dveh proteinov, med seboj in v interakciji z lipidnimi membranami. Iz genomske DNA bakterije S. linguale smo pomnožili gen za egerolizin SlinAg in gen za proteinski partner SlinB. Proteina smo izrazili v heterolognem ekspresijskem sistemu v bakteriji Escherichia coli. Z nikljevo afinitetno kromatografijo smo izolirali egerolizin v topni obliki. Z uporabo cirkularnega dikroizma smo določili sestavo sekundarne strukture rekombinantnega egerolizina in dokazali predominantno β-strukturiranost proteina. Proteina SlinB nismo pridobili v topni obliki, zato nismo preverili v kolikor proteina tvorita kompleks na membrani.20182018-09-08 07:47:32Magistrsko delo/naloga102830VisID: 155142COBISS_ID: 4895567sl