Optimizacija zamrzovanja celic ovarija kitajskega hrčka.Marc, Kaja (Avtor) Narat, Mojca (Mentor) Vatovec, Sabina (Komentor) celične bankezamrzovanjesesalske celiceoptimizacijaCHOkrioprotektantiDMSOSesalske celične linije se pogosto uporabljajo za industrijsko proizvodnjo biofarmacevtskih učinkovin. Celične banke predstavljajo zalogo celične kulture na dolgi rok, pri čemer z zamrzovanjem celicam na nek način ustavimo biološki čas. Iz celične banke lahko kadarkoli vzpostavimo nov bioproces. Da lahko zagotavljamo stabilnost zamrznjene celične kulture, je potrebno celice ustrezno pripraviti na zamrzovanje, saj ob zamrzovanju pride do tvorbe ledu oziroma kristalov zunaj in znotraj celice ter dehidracije, kar vodi v celične poškodbe. V ta namen dodajamo hitro penetrirajoč krioprotektant DMSO, ki ščiti celice pred poškodbami, vendar pa je hkrati, če je v previsoki koncentraciji ali če so mu celice predolgo izpostavljene, zanje toksičen. V magistrskem delu smo testirali, ali bi z nižjo koncentracijo DMSO lahko zmanjšali njegovo toksičnost na celice in tako povečali njihovo preživelost. Ugotovili smo, da bi bilo mogoče ob nižji uporabljeni koncentraciji DMSO med 4,5 in 7 % zamrzniti tudi višje koncentracije celic do 100×106 celic/ml. Visoko preživelost celic smo uspeli obdržati s pripravo zamrzovalne suspenzije v hladnih pogojih, s čimer smo podaljšali čas, ko so celice DMSO lahko izpostavljene pred zamrzovanjem. Pri tem se je močno zmanjšala tudi variabilnost med paralelkami.[K. Marc]20182018-03-25 07:45:07Magistrsko delo/naloga100535UDK: 606:62:57.086.13(043.2)VisID: 151072COBISS_ID: 8972409sl