Analiza genetske variabilnosti tumor-supresorskega gena VHL pri družinski eritrocitozi.Mencin, Iva (Avtor) Debeljak, Nataša (Mentor) Kunej, Tanja (Komentor) genetska variabilnostdružinska eritrocitozaVHLtumor-supresorski gendedne boleznirazličica nukleotidnega zaporedjaDružinska eritrocitoza je redka dedna bolezen, za katero je značilno povišano število rdečih krvničk, lahko tudi povišan hematokrit in hemoglobin. Bolniki s to boleznijo se srečujejo s simptomi, kot so glavoboli, slabosti, krvavitve iz nosu, tromboze in krvavitve, ki lahko vodijo tudi do smrti. Tumor-supresorski protein von Hippel-Lindau (VHL) je del kompleksa, ki sodeluje pri razgradnji proteinov, tudi transkripcijskega dejavnika endotelijske PAS domene, ki se aktivira ob pomanjkanju kisika. Različice nukleotidnega zaporedja v genu VHL lahko vodijo do razvoja družinske eritrocitoze tipa 2. V raziskavi smo v sodelovanju s Specializiranim hematološkim laboratorijem kliničnega oddelka za hematologijo, interna klinika Univerzitetnega kliničnega centra Ljubljana, postavili diagnostično metodo za analizo različic nukleotidnega zaporedja gena VHL povezanih z družinsko eritrocitozo. Optimizirali smo reakcijo PCR, pomnožili odseke gena VHL ter jih sekvencirali z metodo po Sangerju. Z novo razvitim diagnostičnim testom smo analizirali DNA štirih bolnikov z eritrocitozo neznanega vzroka. Na podlagi sekvenčnih reakcij smo ugotovili, da nihče od preiskovanih bolnikov nima različice nukleotidnega zaporedja v genu VHL. S tem smo pri izbranih bolnikih izključili bolezen družinsko eritrocitozo tipa 2. V prihodnje se bo uveden molekularno-genetski test v kombinaciji z drugimi testi ugotavljanja različic v genih, povezanih z družinsko eritrocitozo, uporabljal za rutinsko diagnostiko pri bolnikih z eritrocitozo neznanega vzroka.[I. Mencin]20172017-11-26 07:15:34Magistrsko delo/naloga98324sl