Optimizacija biosinteze rekombinantne fitaze v bakteriji Streptomyces rimosus.Slemc, Lucija (Avtor) Petković, Hrvoje (Mentor) Paš, Maja (Komentor) biotehnologijaStreptomyces rimosusrekombinantna produkcijafitazaoptimizacija gojiščaBakterije iz rodu Streptomyces so poznane predvsem zaradi produkcije antibiotikov. Vse več pa je zanimanja za seve rodu Streptomyces za produkcijo heterolognih proteinov. Cilj magistrske naloge je bil optimizacija produkcijskega gojišča za produkcijo rekombinantne fitaze s pomočjo S. rimosus. Produkcijsko gojišče, ki se trenutno uporablja za kultivacijo S. rimosus je prilagojeno predvsem produkciji tetraciklinov. Pripravili smo različne vrste gojišč in merili fitazno aktivnost. V obsegu magistrske naloge smo izmed dveh sevov S. rimosus izbrali donosnejši sev z oznako e24 za nadaljnja testiranja. Pokazali smo, da ima razmerje med sojino moko in koruznim škrobom vpliv na biosintezo fitaze. Ko je koncentracija sojine moke v gojišču prenizka ali previsoka, se vrednosti fitazne aktivnosti znižajo v primerjavi z osnovnim (nespremenjenim) produkcijskim gojiščem. Vpliv glukoze je odvisen od koncentracije sojine moke in koruznega škroba in časa gojenja, vendar v večini primerov nima pozitivnega vpliva na produkcijo fitaze. Izmed vseh testiranih dodanih virov ogljika in dušika, imajo pozitiven vpliv na produkcijo fitaze: laktoza, dekstrin, sečnina, amonijev sulfat, kvas in kazein. Določili smo optimalno koncentracijo CaCO3, NaCl, cinka, mangana in železa. Dodatek fosforja v produkcijskem gojišču negativno vpliva na produkcijo fitaze. V okviru magistrske naloge smo določili optimalne koncentracije dodatkov in posameznih komponent gojišča za rekombinantno produkcijo fitaze v S. rimosus.[L. Slemc]20172017-07-31 09:55:46Magistrsko delo/naloga94343sl