Določanje spola sejancev hmelja s pomočjo molekulskih označevalcevSehur, Petra (Avtor) Starčič Erjavec, Marjanca (Mentor) Čerenak , Andreja (Komentor) hmeljžlahtnjenjemolekulski označevalcispolDArThkratna PCRhitra izolacija DNAHmelj (Humulus lupulus L.) je gospodarsko pomembna dvodomna rastlinska vrsta iz družine Cannabaceae (konopljevke), ki ima največjo uporabnost v pivovarski industriji. Čeprav so z vidika žlahtnjenja moške rastline hmelja izredno pomembne, pa so z vidika gospodarstva nezaželene v hmeljiščih, ekonomsko vrednost imajo namreč samo neoplojena ženska socvetja (hmeljevi storžki). Pri žlahtnjenju je izrednega pomena pravočasno določanje spola sejancev hmelja, da se del sejancev moškega spola posadi v hmeljišče na drugi lokaciji. Do sedaj je bilo to s 100 % zanesljivostjo mogoče le fenotipsko na podlagi morfoloških razlik med generativnimi organi v času cvetenja. Z uporabo molekulskih označevalcev DArT je to mogoče z enako zanesljivostjo že prej v fazi sejancev. V magistrskem delu smo uspešno vpeljali in optimizirali hkratno PCR s petimi molekulskimi označevalci, od katerih so štirje moško specifični, eden pa je vezan na kloroplastno DNA in ni spolno specifičen (se namnoži pri vseh moških in ženskih rastlinah – interna kontrola pomnoževanja v PCR). Metodo smo preizkusili na 295 sejancih hmelja iz 15 različnih družin križanja in bili pri določanju spola 99,7 % uspešni. Dokazali smo stabilnost in ponovljivost metode. Vpeljali smo še protokol za hitro izolacijo DNA (prvič do sedaj pri hmelju). Z raziskavo smo pomembno vplivali na proces žlahtnjenja hmelja, saj smo zmanjšali obseg dela in stroške, ki so povezani z identifikacijo moških rastlin pri hmelju.20172017-06-05 07:58:51Magistrsko delo/naloga92499sl