Sinhronizacija bakterijske kulture Escherichia coli in njen vpliv na namnoževanje faga T4Hrovat, Jan (Avtor) Podgornik, Aleš (Mentor) sinhronizacijacikelbakteriofagibakterijska kulturaindeks sinhronizacijemetabolna aktivnostbrstno številolatentna periodaadsorpcijska konstantaBakteriofagi predstavljajo obetavno alternativo antibiotikom, njihova učinkovita proizvodnja pa je odvisna od fiziološkega stanja gostiteljskih bakterij. Namen magistrske naloge je bil vzpostaviti vsaj delno sinhronizacijo celične delitve v kulturi Escherichia coli z metodo cikličnega dohranjevanja, ter ovrednotiti vpliv faze sinhronizacijskega cikla na učinkovitost namnoževanja bakteriofagov T4. Sinhronizacijo smo izvedli v s kemijsko definiranim gojiščem, pri čemer smo po vsaki podvojitvi bakterijske populacije odstranili polovico gojitvene brozge in jo nadomestili s svežim gojiščem. Potek procesa smo spremljali z meritvami raztopljenega kisika, optične gostote in številčnostjo živih bakterij (CFU). Stopnjo sinhronizacije smo ovrednotili s sinhronizacijskim indeksom Blumenthala in Zahlerja, ki smo ga izračunali na podlagi eksperimentalno pridobljenih vrednosti CFU. Za določitev vpliva fiziološkega stanja bakterij na razmnoževanje fagov smo v različnih časovnih točkah sinhronizacijskega cikla izvedli infekcijske poskuse z bakteriofagom T4. Ciklično gojenje je omogočilo ponovljive rastne cikle, pri katerih je bila večina celičnih delitev skoncentrirana v drugi polovici cikla, kar potrjuje doseženo delno sinhronizacijo bakterijske populacije. Dokazali smo tudi, da sinhronizacija bakterijske kulture vpliva na uspešnost namnoževanja fagov. V primeru infekcije v optimalnem trenutku sinhronizacijskega cikla se adsorpcijska konstanta ne spremeni, brstno število se poveča, latentna perioda pa se skrajša. Dobljeni rezultati predstavljajo osnovo za optimizacijo proizvodnje bakteriofagov.20262026-09-19 08:16:50Magistrsko delo/naloga188212sl