Ekstrakcija in kvantifikacija proteinov iz odpadnih lupin kozic z uporabo zelenih topilZupančič, Katarina (Avtor) Likozar, Blaž (Mentor) lupine kozicproteiniekstrakcijazelena topilagloboko evtektična topilaEkstrakcija in kvantifikacija proteinov iz odpadnih lupin kozic z uporabo zelenih topil Povzetek: Namen diplomske naloge je bila selektivna ekstrakcija proteinov iz odpadnih lupin kozic z uporabo okolju prijaznih (zelenih) topil. Pripravljenih je bilo 19 topil: Milli-Q voda, trije pufri s pH 7 (fosfatni, McIlvainov in fosfatni pufer s slano raztopino) ter 15 globoko evtektičnih topil na osnovi holin klorida in betaina s 15 wt. % vode. Štiri globoko evtektična topila so se pri sobni temperaturi strdila, zato je bilo v ekstrakciji trdno–tekoče (razmerje trdna snov:tekočina 0,2, 25 °C, 300 min-1, 30 min) preizkušenih 15 topil. Vsebnost proteinov v supernatantu je bila določena z UV-Vis spektroskopijo pri 280 nm z umeritevno krivuljo govejega serumskega albumina, ekstrakcija astaksantina pa z absorbanco pri 482 nm. Skupna količina proteinov, ki jih lahko ekstrahiramo iz biomase, določena s šestimi zaporednimi cikli ekstrakcije z McIlvaineovim pufrom pH 7, je znašala 45,0 mg/g lupin. Največjo učinkovitost ekstrakcije v enem ciklu sta dosegli globoko evtektični topili betain:propionska kislina (94,6 %) in holin klorid:malonska kislina (93,6 %), vendar sta obe ekstrahirali tudi astaksantin. Kot najprimernejše zeleno topilo, ki združuje visoko učinkovitost (68,4 %) in visoko selektivnost za proteine, je bil izbran betain:ocetna kislina.20262026-09-08 10:05:08Diplomsko delo/naloga187010sl