Prostorska karakterizacija in kvantitativna analiza izražanja DAB2 v mikrookolju glioblastomaKokol, Anja (Avtor) Breznik Vittori, Barbara (Mentor) biološki označevalecDAB2glioblastomtumorsko mikrookoljeGlioblastom je najpogostejši maligni možganski tumor in ostaja ena izmed najbolj agresivnih in smrtonosnih oblik raka, saj je mediana preživetja ob diagnozi le 12–15 mesecev. Zdravljenje glioblastoma, ki trenutno obsega kirurško odstranitev, ki ji sledi kombinacija radioterapije ter kemoterapije s temozolomidom, še vedno predstavlja velik izziv, predvsem zaradi lokacije tumorja, njegove heterogene narave, invazivnosti rakavih celic ter razvoja odpornosti na terapijo. V klinični praksi obstaja omejen nabor bioloških označevalcev, s katerimi bi natančneje napovedali možnost preživetja in spremljali odziv na zdravljenje, zato je ključno iskanje novih označevalcev z upoštevanjem delovanja in interakcij celic znotraj kompleksnega tumorskega mikrookolja. Raziskovalci na Nacionalnem inštitutu za biologijo so z analizo transkriptoma na vzorcih tumorjev slovenske populacije bolnikov z glioblastomom identificirali gen DAB2 kot prognostični označevalec, saj je bilo njegovo povišano izražanje v tumorjih povezano s krajšim preživetjem bolnikov. DAB2 je adapterski protein, ki v zdravih celicah sodeluje pri procesu s klatrinom posredovane endocitoze in ima pomembno vlogo pri uravnavanju signalnih poti, udeleženih pri proliferaciji, diferenciaciji in apoptozi celic. V diplomski nalogi smo z imunofluorescenčno metodo analizirali izražanje proteina DAB2 v različnih celičnih tipih znotraj tumorskega mikrookolja glioblastoma. Izražanje DAB2 smo potrdili v imunskih celicah, predvsem v mikrogliji in makrofagih. Najpogosteje so bile DAB2-pozitivne celice prisotne na območju perivaskularne niše, v neposredni bližini CD31- in FAP-pozitivnih celic, v katerih pa DAB2 ni bil prisoten. Izražanje proteina DAB2 smo zaznali v glioblastomskih matičnih celicah, ne pa tudi v diferenciranih tumorskih celicah. V drugem delu diplomske naloge smo na analiziranih vzorcih izvedli kvantitativno analizo izražanja DAB2, pri kateri smo ugotovili razlike med posameznimi bolniki ter primerjali ravni mRNA z izražanjem proteina DAB2. Ti rezultati odražajo heterogenost glioblastoma in nakazujejo prisotnost kompleksnih regulatornih mehanizmov na transkripcijski in posttranskripcijski ravni, ki vplivajo na povezavo med količino transkripta (mRNA) in količino izraženega proteina. Rezultati diplomske naloge predstavljajo pomembno izhodišče za nadaljnje raziskovanje vloge proteina DAB2 v biologiji glioblastoma ter njegovega potenciala kot biološkega označevalca oziroma terapevtske tarče pri zdravljenju te bolezni.20262026-09-04 12:45:12Diplomsko delo/naloga186740sl