Vpliv zunajceličnega matriksa na diferenciacijo skeletnomišičnih celic v razmerah in vitroKociper, Debora (Avtor) Pirkmajer, Sergej (Mentor) miozindezminnatrij-kalijeva ATPazaMatrigelGeltrexKomponente zunajceličnega matriksa pomembno vplivajo na rast in diferenciacijo skeletnomišičnih celic. V eksperimentih in vitro si prizadevamo doseči zrelejšo obliko mišičnih vlaken, ki kar najbolje odražajo stanje in vivo. Zato se pogosto uporabljajo podlage kot sta Matrigel in Geltrex, ki posnemata sestavo in lastnosti zunajceličnega matriksa. Namen diplomske naloge je bil ugotoviti vpliv Matrigela in Geltrexa na označevalce diferenciacije primarnih človeških skeletnomišičnih celic. Z metodo prenosa western smo določili količine dezmina, MYH7, cepljene kaspaze 3, ter α1, α2 in β1 podenot natrij-kalijeve črpalke (ATP1A1, ATP1A2, ATP1B1). Celice, gojene na podlagah Matrigel in/ali Geltrex, so vsebovale višjo celokupno količino proteinov, višje količine dezmina, MYH7 ter ATP1A1 izooblike natrij-kalijeve črpalke kot celice, gojene neposredno na polistirenu, kar bi lahko pomenilo izboljšano diferenciacijo. Prisotnost cepljene kaspaze 3 ni bila odvisna od tipa podlage, pač pa od gostote celic. Višja gostota celic je bila povezana z višjo količino cepljene kaspaze 3. Z metodo RT qPCR, kjer je endogeno kontrolo predstavljala peptidilprolil izomeraza A, smo določili raven mRNA MYH1, MYH7 in DES. Celokupna količina izolirane RNA je bila višja pri pogojih Matrigel in Geltrex kot pri polistirenu, a statistično značilnih razlik v količini mRNA za dezmin, MYH1 in MYH7 med podlagami ni bilo. Rezultati nakazujejo na pozitiven vpliv podlag Matrigel in Geltrex na diferenciacijo primarnih človeških skeletnomišičnih celic in predstavljajo izhodišče za nadaljne raziskave optimizacije in vitro modelov skeletne mišice.20262026-08-26 10:30:04Diplomsko delo/naloga186055sl