Povezave med lipidnimi kapljicami in mehanizmi uravnavanja membranske sestave pri feroptoziVončina, Kaja (Avtor) Petan, Toni (Mentor) feroptozarak dojkelipidne kapljicelipidni metabolizempreoblikovanje membranmaščobne kislineAGPAT3LPCAT3Preoblikovanje membranskih lipidov in s tem membran je pomembno za učinkovito prilagajanje rakavih celic okolju. Pomembno vlogo pri uravnavanju maščobnokislinske sestave membran imata aciltransferazi AGPAT3 in LPCAT3, ki vplivata na vsebnost polinenasičenih maščobnih kislin v fosfolipidih in s tem uravnavata občutljivost celic za feroptozo. Ni pa znano, kako je delovanje AGPAT3 in LPCAT3 povezano s presnovo lipidnih kapljic (LK), ki služijo tudi kot skladišče različnih maščobnih kislin, shranjenih v obliki nevtralnih lipidov. V tem delu smo v celičnem modelu agresivnega raka dojke s tehnikami RNA interference v kombinaciji s farmakološko in presnovno modulacijo LK ter feroptotskih obrambnih mehanizmov preučevali vlogo AGPAT3 in LPCAT3 pri občutljivosti celic za feroptozo v povezavi s homeostazo lipidov. V celicah smo sprožili feroptotski stres z dodatkom RSL3, inhibitorja glutation peroksidaze 4, medtem ko smo na biogenezo, količino in sestavo LK vplivali z dodatkom inhibitorjev diacilglicerol aciltransferaz 1 in 2 (DGATi) ter dokozaheksaenojske kisline (DHA). Ugotovili smo, da utišanje AGPAT3 zmanjša občutljivost celic za feroptozo, inducirano z RSL3, kar se kaže v zmanjšanem deležu mrtvih celic in nižji lipidni peroksidaciji. Utišanje LPCAT3 ni vplivalo za feroptozo, ki smo jo inducirali le z RSL3, vendar se je občutljivost izrazito zvišala, ko smo dodali še DGATi. Pri obeh utišanjih smo opazili kopičenje nevtralnih lipidov v LK in negativen vpliv na viabilnost celic. Ugotovili smo tudi, da visoka raven feroptotskega stresa vpliva na količino proteinov, vpletenih tako v presnovo LK kot v preoblikovanje membran, vključno z AGPAT3, ACSL3, ACSL4 in lipazo ATGL. Naše ugotovitve ponujajo nov vpogled v povezave med procesi, ki uravnavajo sestavo membran, presnovo LK in feroptozo, ter prispevajo k boljšemu razumevanju mehanizmov, ki uravnavajo občutljivost rakavih celic MDA-MB-231 na lipidno peroksidacijo in feroptotski stres.[K. Vončina]20262026-07-19 07:15:49Magistrsko delo/naloga184969sl