Presnovna odzivnost astrocitov v kulturi na stimulacijo adenozinskih receptorjevBelko Parkel, Kaja (Avtor) Kreft, Marko (Mentor) adenozinski receptorjiglikogenlaktatastrocitiFRETTRPV4Koncentracija zunajceličnega adenozina v možganih se poveča ob večji presnovni obremenitvi in signalizira prek adenozinskih receptorjev, vendar vloga posameznih podtipov pri uravnavanju energijske presnove astrocitov še ni v celoti pojasnjena. Za razčlenitev specifičnih učinkov receptorjev smo v primarnih podganjih astrocitih kombinirali meritve v živih celicah s senzorji FRET za glukozo, laktat in cAMP ter spremljanje znotrajcelične koncentracije kalcija. Vpliv mehanskih dražljajev smo raziskali z aplikacijo kratkih tlačnih pulzov in sprotnim spremljanjem citosolnega laktata. Prispevek posameznih receptorjev smo proučevali z uporabo adenozina in selektivnih agonistov. Adenozin je zvišal znotrajcelično koncentracijo glukoze. Med posameznimi podtipi je ta učinek reproducirala zgolj aktivacija receptorjev A2B. Ob pomanjkanju zunajcelične glukoze sta tako adenozin kot aktivacija receptorjev A2B povzročila zvišanje citosolne glukoze, kar kaže na aktivacijo glikogenolize. Analiza glikogena je pokazala, da stimulacija receptorjev A2A in A2B poveča perinuklearne zaloge glikogena, pri čemer aktivacija A2B dodatno poveča tudi periferne zaloge glikogena. Med okrevanjem po stradanju sta adenozin in agonist receptorjev A2B upočasnila obnovo glikogena. Koncentracija cAMP se je povečala ob stimulaciji receptorjev A2A in A2B ter po antagonizmu receptorjev A1, ne pa tudi po dodatku adenozina, kar je skladno z uravnoteženo soaktivacijo receptorjev. Kalcijevi odzivi so bili pri adenozinu ter stimulaciji receptorjev A1 prehodni, medtem ko so bili ob aktivaciji receptorjev A2A in A2B dolgotrajni. Selektivna aktivacija receptorjev A2B je povzročila tudi statistično značilno zvišanje citosolnega laktata v primerjavi s kontrolo. Mehanska stimulacija s tlačnimi pulzi je sprožila od tlaka odvisno zvišanje citosolne koncentracije laktata. Skupaj ti podatki kažejo, da je signalizacija prek receptorjev A2B ključni mehanizem akutne mobilizacije glukoze in regulacije glikogena v astrocitih ter da astrociti mehanske dražljaje pretvorijo v presnovni signal.[K. Belko Parkel]20262026-07-05 07:16:27Doktorsko delo/naloga184341sl