Vpliv N-glikozilacije terapevtskih monoklonskih protiteles na njihove efektorske funkcijeCvijić, Tamara (Avtor) Narat, Mojca (Mentor) Monoklonska protitelesaglikaniBLIbiološki testimultipla linearna regresijaRazvoj novih terapevtskih proteinov in podobnih bioloških zdravil, vključno s protitelesi, zahteva dobro razumevanje povezave med njihovo strukturo in funkcijo. Posebej pomembno je razumevanje, kako glikozilacija IgG vpliva na njegove efektorske funkcije, kar vse bolj poudarjajo smernice Svetovne zdravstvene organizacije in regulatornih agencij. Medsebojna koreliranost, nizka variabilnost in pomanjkanje dobro definiranih glikanskih profilov v vzorcih, ki jih pridobimo tekom razvoja procesa in proizvodnje, močno otežijo preučevanje vpliva posameznih glikanskih skupin. Pristopi, poročani v literaturi, pogosto temeljijo na neoptimalnih eksperimentalnih strategijah, kjer proučujejo vsak dejavnik posebej in uporabljajo univariatno analizo podatkov. V nalogi predlagamo sistematičen pristop za razumevanje in napovedovanje vpliva Fc glikanskih struktur na efektorske funkcije IgG. Najprej smo z glikoinženiringom optimizirali pripravo ustreznih vzorcev IgG. Nato smo z analitskimi tehnikami ovrednotili njihove glikanske strukture, vezavne afinitete in biološko aktivnost. Na podlagi teh rezultatov smo razvili multiple linearne regresijske modele, ki omogočajo kvantitativno vrednotenje in napoved, kako posamezne glikanske skupine vplivajo na vezavo terapevtskih IgG1 in IgG4 na FcγR ter na njihovo biološko aktivnost. Ob tem smo pokazali tudi, da lahko posamezne glikanske izoforme povzročijo specifične učinke na funkcijo, ki se lahko razlikujejo od vpliva celotne glikanske skupine, zato jih moramo v nekaterih primerih pri vrednotenju funkcije IgG posebej upoštevati. Z našim delom smo vzpostavili sistematičen kvantitativni pristop za razumevanje multivariatnega vpliva glikozilacije na efektorske funkcije terapevtskih monoklonskih protiteles in ponudili uporabno orodje za učinkovitejši in hitrejši razvoj terapevtskih proteinov.20262026-06-06 07:15:24Doktorsko delo/naloga183164sl