Mikro RNA kot diagnostični označevalci granulomatoze s poliangiitisom v biopsijah sinonazalne sluzniceŽivanović, Milanka (Avtor) Volavšek, Metka (Mentor) Hočevar, Alojzija (Komentor) granulomatoza s poliangiitisomsinonazalna sluznicavnetjemikro RNAbiološki označevalciGranulomatoza s poliangiitisom (GPA) je redka avtoimunska bolezen, ki jo uvrščamo med vaskulitise, katerih patogeneza je povezana s prisotnostjo protiteles proti sestavnim delom citoplazme nevtrofilnih granulocitov (ANCA). GPA pogosto prizadene zgornja dihala, zlasti sinonazalno sluznico. Biopsija sinonazalne sluznice lahko pomembno prispeva k diagnozi GPA, vendar so v biopsiha pogosto prisotne le neznačilne vnetne spremembe, za GPA značilne histološke spremembe pogosto niso prisotne, zato je zgodnja prepoznava bolezni pogosto otežena. Epigenetika, zlasti izražanje mikro RNA (miRNA), igra ključno vlogo v patogenezi avtoimunskih sistemskih bolezni, miRNA izkazujejo potencial kot biološki označevalci za to skupino bolezni. V naši raziskavi smo analizirali izražanje miRNA v sino-nazalnih biopsijah bolnikov z GPA in preverili, v kolikšni meri izražanje miRNA v biopsijskih vzorcih pripomore k zgodnejši prepoznavi bolezni. V raziskavo smo vključili 37 biopsijskih tkivnih vzorcev sinonazalne sluznice bolnikov z GPA, 15 vzorcev sinonazalne sluznice bolnikov z vnetjem druge etiologije ter 14 vzorcev preiskovancev brez histoloških sprememb v sinonazalni sluznici, ki so služili kot kontrolna skupina. Ocena histoloških parametrov je bila izvedena z uporabo histoloških tehnik, analiza izražanja miRNA pa z uporabo komercialnega kompleta miRCURY LNA miRNA miRNome Human PCR Panel I+II in kvantitativno PCR v realnem času (qPCR). Od vključenih bolnikov z GPA je imelo 20 bolnikov za GPA značilno histološko sliko, 17 bolnikov pa za GPA nespecifične histopatološke spremembe. S profiliranjem izražanja miRNA v tkivnih vzorcih sinonazalne sluznice smo določili izražanje 306 miRNA, z razlikami v nivoju izražanja med posameznimi podskupinami bolnikov in preiskovancev. Na osnovi rezultatov profiliranja izražanja miRNA smo za nadaljnjo validacijo izražanja na posameznih vzorcih s qPCR izbrali 11 miRNA (miR-1-3p, miR-31-3p, miR-155-5p, miR-183-5p, miR-21-3p, miR-106a-5p, miR-190b-5p, miR-1248, let-7b-5p, miR-93-5p in miR-182-5p), katerih profili izražanja so omogočali statistično značilno razlikovanje med vključenimi skupinami bolnikov in preiskovancev. Z našo raziskavo smo določili vzorce izražanja različnih miRNA, povezanih z diagnozo GPA, ki so bile v korelaciji s kliničnimi in histološkimi parametri bolnikov. Te miRNA predstavljajo obetavne diagnostične biološke označevalce, ki bi lahko prispevali k zgodnejši in zanesljivejši diagnozi GPA v tkivu sinonazalne sluznice, zlasti pri oceni bolnikov v naj-zgodnejših fazah GPA ali tistih z atipično klinično in/ali histološko sliko.20252025-11-19 07:15:11Doktorsko delo/naloga176033sl