Tehnologija CRISPR-Cas9 in njena uporabaBregar, Nika (Avtor) Ogorevc, Jernej (Mentor) biotehnologijagenski inženiringCRISPR-Cas9dCas9urejanje posameznih bazurejanje »prime«CRISPR-Cas sistem, ki je naravno prisoten pri določenih bakterijah in arhejah, predstavlja pomembno orodje v biotehnologiji. Boljše razumevanje in nadaljnji razvoj te tehnologije bosta omogočila napredek na številnih področjih, kot so gensko inženirstvo, zdravljenje bolezni, kmetijstvo, prehranska industrija, ekologija, farmacija in mnoga druga. Najpogosteje uporabljan sistem temelji na endonukleazi Cas9 in njenih derivatih (dCas9, nCas9). Poznamo več aplikacij CRISPR-Cas9. Med najpomembnejše v genskem inženirstvu sodijo klasični sistem CRISPR-Cas9 in modificirani sistemi, ki omogočajo regulacijo izražanja genov (CRISPR-dCas9), urejanje posameznih nukleotidov in epigenetske modifikacije. Med sodobnejše pristope spada urejanje »prime«, ki poleg zamenjave posameznih nukleotidov omogoča tudi uvedbo manjših insercij ali delecij na tarčna mesta. Slednji predstavlja velik preboj na tem področju, saj so z baznimi urejevalci in sistemom urejanja »prime« uspeli preseči omejitve klasičnega CRISPR-Cas9 sistema. Kljub velikemu potencialu se tehnologija sooča s kar nekaj pomanjkljivostmi, med katerimi so najpomembnejša potencialni izventarčni učinki. Ker pri uporabi in vivo izventarčni učinki niso sprejemljivi, je ključnega pomena, da jih poskušamo odpraviti. Poleg tehničnih omejitev tehnologije pa se pojavljajo tudi etična vprašanja, zlasti v povezavi s preurejanjem genoma na zarodkih in spolnih celicah, kar bi lahko pomenilo prenos sprememb na naslednje generacije in možne nepredvidljive posledice.20252025-09-12 07:16:32Diplomsko delo/naloga172880sl