Načrtovanje, sinteza in vrednotenje novih zaviralcev in himernih razgrajevalcev človeškega galektina-8Purić, Edvin (Avtor) Anderluh, Marko (Mentor) galektinigalektin-8zaviralci galektina-8imunski odzivtumortest fluorescenčne polarizacijehimerni razgrajevalciGalektin-8 igra pomembno vlogo v prirojenem in pridobljenem imunskem odzivu, saj je vključen v širok spekter fizioloških procesov in pri številnih boleznih, zaradi česar je zanimiva tarča za zelo močne in selektivne zaviralce galektina-8N. V našem delu smo zasnovali knjižnice spojin, začenši z znanim zaviralcem galektina-8N, ki ima nizko mikromolarno afiniteto za galektin-8N in rahlo selektivnost v primerjavi z galektinom-3, ki ima podobno vezavno mesto kot galektin-8N. Z našo strategijo smo uspeli pripraviti prve zaviralce galektina-8N z vrednostmi Kd v nanomolarnem območju in nekoliko izboljšano selektivnostjo do galektina-3 v primerjavi s spojino vodnico. Izotermna titracijska kalorimetrija (ITC) je pokazala pomembne razlike v entalpijskih in entropijskih prispevkih k vezavi in zelo zanimiv termodinamski odtis izbranih zaviralcev galektina-8N. Pridobili smo kristalno strukturo 2-O-propargilnega derivata v kompleksu z N-končno domeno galektina-8, ki nakazuje na interakcijo med acetilenskim delom kokristaliziranega liganda in gvanidinskim delom stranske verige Arg45. Nadaljnji kvantno-mehanski izračuni so potrdili novo vrsto interakcije, ki do zdaj še ni bila opisana in jo lahko označimo kot nekanonično kation-π interakcijo. Poleg tega smo dokazali, da je test fluorescenčne polarizacije zanesljiva metoda za rešetanje in se lahko uporablja pri rešetanju visoke zmogljivosti zaviralcev galektina-8N. Hkrati smo pripravili novo fluorescentno sondo, ki zahteva manj sinteznih korakov v primerjavi s tetrasaharidno LNnT sondo in se lahko alternativno uporablja pri rešetanju zaviralcev galektina-8N. Skupaj s partnerji z Univerze v Firencah smo uspešno zasnovali BODIPY sondo in dokazali njeno uporabnost pri preučevanju lektinov v testih na osnovi fluorescence. Kot prvi smo načrtovali, sintetizirali in biološko ovrednotili himerni razgrajevalec (PROTAC) galektina-8, ki je povzročil razgradnjo galektina-3 in -8 v celicah raka dojke. Nasprotno pa nobena od načrtovanih molekul PROTAC ni vplivala na ravni galektina-3 in -8 v celicah HUVEC. Rezultati testa angiogeneze in vitro so pokazali spremembe v tvorbi cevk, medtem ko popolno zaviranje angiogeneze ni bilo doseženo.20252025-09-04 13:41:55Neznano171959sl2021-2025