Vloga plektina pri razporejanju citoskeleta in mitohondrijev v mišjih astrocitihŽugec, Maja (Avtor) Potokar, Maja (Mentor) plektincitoskeletmitohondrijiastrocitimigracijeakvaporin 4glioblastomPlektin je protein, ki med seboj povezuje elemente citoskeleta, zato ga imenujemo citolinker, prav tako je vpleten v razporejanje posameznih organelov. Vloga plektina v astrocitih še ni raziskana. V imortaliziranih in primarnih mišjih astrocitih, ki izražajo plektin, ter imortaliziranih in primarnih mišjih astrocitih z izbitim genom za plektin, ter z uporabo plazmidov, ki kodirajo različne izooblike plektina, in fluorescenčne konfokalne mikroskopije, smo ovrednotili parametre razporejanja elementov citoskeleta, hitrost migracij ter obliko in funkcije mitohondrijskega omrežja. Ugotovili smo, da je plektin vpleten v razporejanje vseh elementov citoskeleta, ki se izražajo v citoplazmi astrocitov. Prav tako ima plektin pomembno vlogo pri hitrosti migracij astrocitov, saj imortalizirani astrociti, ki ne izražajo plektina migrirajo počasneje, kot astrociti, ki plektin izražajo. Z označevanjem mitohondrijev smo pokazali, da sta oblika mitohondrijskega omrežja in število funkcionalnih mitohondrijev drugačni v astrocitih, ki plektina ne izražajo. Prav tako smo v astrocitih z izbitim genom izmerili večje kopičenje reaktivnih kisikovih zvrsti po stimulaciji z rotenonom. Pokazali smo tudi, da je razporejanje Golgijevega aparata in endoplazemskega retikuluma drugačno v astrocitih z izbitim genom za plektin. V luči recentnih raziskav, ki nakazujejo, da bi plektin lahko uporabili kot označevalec pri določenih tipih raka, smo dodatno ovrednotili pojavljanje plektina na površini astrocitov. Ugotovili smo, da človeške glioblastomske celice izražajo več površinskega plektina kot primarni človeški astrociti, kar bi lahko pomenilo, da ima plektin potencial uporabe kot eden izmed označevalcev za glioblastom. Poleg tega smo ugotovili, da odsotnost izražanja plektina v imortaliziranih in primarnih mišjih astrocitih zmanjša količino in velikost skupkov akvaporina 4 na plazmalemi, ki vplivajo na hitrost migracij astrocitov. Zaključili smo, da lahko plektin prek sprememb v razporejanju različnih tipov citoskeleta vpliva na razporejanje in delovanje organelov v astrocitih in na njihove migracije, ter da prisiljeno izražanje specifičnih izooblik plektina v astrocitih z izbitim genom za plektin približa rezultate analiziranih parametrov vrednostim, ki so izmerjene v astrocitih, ki izražajo nativni plektin.[M. Žugec]20252025-07-11 07:15:06Doktorsko delo/naloga170634sl