Izolacija in ekspanzija mišjih regulatornih celic T ob prisotnosti rapamicinaŽnidarčič, Jon (Avtor) Pohar, Jelka (Mentor) Leben, Katja (Komentor) imunologijaavtoimunske bolezniregulatorne celice T (Treg)rapamicinmTORpretočna citometrijaRegulatorne celice T (Treg) so ključne za uravnavanje imunske homeostaze in preprečevanje avtoimunskih bolezni. Njihova izrazita imunosupresivna funkcija jih uvršča med obetavne tarče za razvoj terapevtskih pristopov pri avtoimunskih boleznih in imunski zavrnitvi presadkov vendar razvoj otežujejo njihova nizka frekvenca, pa tudi izzivi pri izolaciji in razmnoževanju teh celic. Eden izmed pristopov za selektivno spodbujanje rasti Treg celic je uporaba antibiotika rapamicina, ki z zaviranjem tarče mTOR delno omeji proliferacijo efektorskih celic T ter spodbuja diferenciacijo Treg celic, kar se kaže v povečanem deležu Treg v vzorcih. V diplomski nalogi smo iz mišjih vranic izolirali Treg celice z negativno selekcijo izolacije CD4+ celic in pozitivno selekcijo CD25+ celic. Celice smo gojili 15 dni pri različnih koncentracijah rapamicina ob prisotnosti citokina mIL-2 in vmes spremljali število in viabilnost celic. Na koncu smo vzorce analizirali s pomočjo pretočne citometrije. Uspešno smo kvantificirali izražanje značilnih površinskih in znotrajceličnih označevalcev in s tem določili obseg populacije Treg. Povečan delež Treg v primerjavi s celicami T pomagalkami (Th) smo opazili pri povišani koncentraciji rapamicina (100 nM). Viabilnost in število celic sta bila v vzorcih brez rapamicina višja kot pri vzorci ob prisotnosti rapamicina. Uporaba rapamicina pri človeških Treg je že standardni dodatek, pri mišjih Treg pa še ni standardizirana. V literaturi poročajo o izboljšani kot tudi zmanjšani ekspanziji mišjih Treg celic ob prisotnosti rapamicina. Z diplomskim delom smo pridobili preliminarne rezultate, na podlagi katerih lahko načrtujemo naslednje eksperimente za oblikovanje zanesljivejših zaključkov.20252025-07-06 07:16:14Diplomsko delo/naloga170447sl