Primerjava učinkovitosti izolacije primarnih človeških matičnih/stromalnih celic iz različnih perinatalnih tkivŠkufca, Valentina (Avtor) Zupan, Janja (Mentor) Trojner Bregar, Andreja (Komentor) primarne mezenhimske matične/stromalne celiceperinatalna tkivasposobnost tvorbe kolonijregenerativna medicinaMezenhimske matične/stromalne celice (MSC) so redka in heterogena populacija multipotentnih celic, ki so prisotne v vseh tkivih človeka. Perinatalne matične celice ali matične celice porodnih tkiv vključujejo različne vrste celic, med katerimi so tudi MSC in jih pridobimo iz perinatalnih tkiv. Večina teh celic izraža določene lastnosti in celične označevalce tako multipotentnosti kot pluripotentnosti. Zaradi svoje genetske stabilnosti ne tvorijo tumorjev ter izkazujejo imunosupresivne lastnosti preko parakrinega mehanizma komunikacije. Pri perinatalnih matičnih celicah je ključna njihova enostavna pridobitev, relativno nezahtevno gojenje v pogojih in vitro ter možnost hrambe v biobankah. Imajo potencial za zdravljenje različnih bolezni, zato njihov razvoj in uporaba v regenerativni medicini hitro naraščata. Namen naloge je bil primerjati učinkovitost izolacije primarnih humanih MSC, pridobljenih iz štirih različnih perinatalnih tkiv darovalk po porodu. Porodnice so v raziskovalne namene darovale košček amnijske membrane (AM), posteljice (PL), popkovnice (POP) in 1 ml popkovnične krvi (PK). V raziskavi smo preučevali ali se primarne celice iz teh štirih tkiv razlikujejo v času pojava pritrjenih celic v pogojih in vitro ter v njihovi sposobnosti tvorbe kolonij celic (CFU-F). Celice smo spremljali s fazno-kontrastno verzijo svetlobnega mikroskopa. Zabeležili smo čas pojava pritrjenih celic in izvedli test CFU-F. Na podlagi teh rezultatov smo ocenili učinkovitost izolacije primarnih celic iz preiskovanih tkiv porodnic. Čas do pojava pritrjenih celic v pogojih in vitro se je med primarnimi humanimi MSC, pridobljenimi iz štirih različnih perinatalnih tkiv razlikoval. Vzorci PL so pokazali statistično značilno daljši čas do pojava pritrjenih celic v primerjavi z vzorci AM. Vendar pa so vsi vzorci pokazali enako sposobnost tvorbe kolonij in učinkovitost izolacije primarnih celic. Pri več kot polovici vzorcev je bila neuspešna oz. neučinkovita izolacija, kar nakazuje potrebo po izboljšavah v postopku izolacije primarnih celic iz teh tkiv, pogojih gojenja ter izbiri primernejšega celičnega gojitvenega medija. Zaradi majhnega števila vključenih porodnic in pogoste variabilnosti rezultatov, bi za natančnejšo oceno potrebovali večje število vključenih vzorcev, da bi pridobili zanesljivejše in bolj reprezentativne podatke. Poleg tega bi bilo smiselno analizirati tudi porodnice, kar bi omogočilo boljšo opredelitev ciljne populacije nosečnic.20252025-07-02 13:18:02Magistrsko delo/naloga170130sl