Priprava vzorcev svile za velikostno izključitveno kromatografijoLipoglavšek, Kaja (Avtor) Strlič, Matija (Mentor) svilafibroinSECrazgradnjaSvila je že stoletja cenjen material. Za zaščito zgodovinsko pomembnih izdelkov narejenih iz svile, je potrebno ugotoviti stopnjo njene razgradnje. To lahko ugotovimo s spremljanjem spremembe dolžine verig proteina fibroina, ki je glavni sestavni del svile. Porazdelitev molske mase fibroina lahko preučujemo z uporabo velikostno izključitvene kromatografije (SEC). Optimizirala sem način priprave vzorcev svile za SEC analizo in analizirala različne vrste svile. Analizirala sem svile iz treh različnih virov (slovensko, indijsko in belgijsko), ki so bile obdelane na različne načine: neobdelana, različno obtežene svile, svilo pospešeno razgrajeno na štiri različne načine in svilo, ki sem ji dodala tripsin. Izkazalo se je, da je optimalna priprava vzorcev sledeča: vzorce sem raztapljala v koncentriranem LiBr, nato pa jih 6 h dializirala, 1 h v MQ-vodi in 5 h v citratnem pufru uporabljenim za mobilno fazo, na koncu pa sem jih centrifugirala. Raziskala sem stabilnost vzorca v LiBr in ugotovila, da vzorec s časom v LiBr razpada. Ugotovila sem, da različni načini pospešene razgradnje svile različno vplivajo na njeno razgradnjo, predvsem jo pospešujeta višja temperatura in večja vlažnost. Obteževanje svile je otežilo njeno raztapljanje, saj se obtežena svila z izbranim postopkom ni povsem raztopila, zato sem z metodo FTIR preverila, kateri del svile ostane neraztopljen in ugotovila, da neraztopljeni del vsebuje tudi fibroin.20252025-06-13 13:05:05Diplomsko delo/naloga169885sl