Vrednotenje orodja za razvoj tekočinsko-kromatografskih metod in silico na primeru izbranih učinkovinJanežič, Blaž (Avtor) Mravljak, Janez (Mentor) tekočinska kromatografijaPractical HPLC Simulatorrazvoj metodsimulatoribuprofenketoprofenlidokainRazvoj analitskih metod je kontinuiran proces, ki spremlja metodo skozi njen življenjski cikel, od začetnega razvoja do implementacije v kontrolo kakovosti in prenosov med laboratoriji. Tradicionalni pristop naključnega preizkušanja je dolgotrajen in omejen pri odkrivanju interakcij med parametri. Alternativo predstavlja pristop razvoja z vgrajeno kakovostjo, ki uporablja statistične metode in načrtovanje eksperimentov ter se osredotoča na sistemski razvoj, kjer kakovost načrtujemo in razumemo že v samem začetku procesa razvoja. Smernica mednarodnega sveta za harmonizacijo tehničnih zahtev za zdravila za uporabo v humani medicini Q14 iz leta 2024 uvaja koncept razvoja z vgrajeno kakovostjo tudi na področju analitskih metod. Razvoj metod in silico temelji na matematičnih modelih za napovedovanje vpliva kromatografskih pogojev. V magistrski nalogi sta bili razviti in preizkušeni analizni metodi tekočinske kromatografije visoke ločljivosti za analizo ibuprofena in ketoprofena ter za referenčni pripravek z lidokainom, 2,6-ksilidinom, metilparabenom in propilparabenom. V nalogi je prikazan sistematičen razvoj metod, ki vključuje ovrednotenje fizikalno-kemijskih lastnosti analitov, postavitev zahtev ustreznosti metode, izbiro začetnih pogojev, izvedbo izvidniškega gradienta in optimizacijo z različnimi mobilnimi fazami in tipi stacionarnih faz. V okviru magistrskega dela smo za ovrednotenje orodja Practical HPLC Simulator preverili hipoteze ujemanja retencijskega časa, učinkovitosti kolone in faktorja ločbe med napovedmi in silico in eksperimentalno določenimi rezultati na sistemu HPLC. Simulator je sicer točno napovedal nekatere parametre, kot sta faktor ločbe in simetrija vrhov, vendar je retencijski čas pogosto napačno ocenjen, pri čemer je stopnja odstopanja odvisna od posameznega analita. Glede na pridobljene rezultate smo zaključili, da je orodje Practical HPLC Simulator uporabno za hitro testiranje sprememb parametrov metod in silico, vendar njegova omejena točnost onemogoča uporabo kot primarnega orodja za razvoj metod. Ugotovili smo, da ima potencial kot pripomoček v začetnih fazah razvoja preprostih metod in kot izobraževalno orodje. Nadaljnje raziskave bi morale vključevati širši spekter molekul in razlago odstopanj med napovedmi in dejanskimi meritvami.20252025-03-07 08:45:05Magistrsko delo/naloga167692sl