Priprava semena z mikrofluidnim čipom za izboljšanje postopkov zunajtelesne oploditveHabe, Anja (Avtor) Jančar, Nina (Mentor) Štimpfel, Martin (Komentor) moška neplodnostmikrofluidni čipcentrifugiranjekakovost semenčicestruktura kromatinafragmentacija DNKmorfologijavezava na hialuronanizid OBMPZa moško neplodnost je pogosto vzrok slaba kakovost semena. Njegovo oploditveno sposobnost določajo morfološke in ultrastrukturne lastnosti ter integriteta membrane semenčic. Na razvoj zarodka, kakovost in izid nosečnosti pa ima večji vpliv zrelost kromatina semenčic ter struktura in poškodbe DNK. V magistrski nalogi smo primerjali pripravo semena s centrifugiranjem preko dvoslojnega gradienta (DGC) napram mikrofluidiki (MF). Slednja simulira ovire, primerljive materničnemu vratu in maternici, s čimer posnema naravno selekcijo semenčic. Pri pregledu kakovosti semenčic smo ocenjevali vezavo na hialuronan, morfologijo, zrelost nukleoproteinov in fragmentacijo DNK. Deleža semenčic, ki vežejo hialuronan in morfološko normalnih semenčic sta bila pri obeh metodah priprave semena primerljiva. Deleža zrelih nukleoproteinov in fragmentacije DNK pokažeta, da je metoda priprave semena z mikrofluidiko uspešnejša pri izboru semenčic z višjo gensko integriteto. Po oploditvi s semenom, pripravljenim z DGC in MF, smo preverili deleže oplojenih celic, kakovost zarodkov in stopnjo zanositve glede na način priprave semena pri vseh obravnavanih parih. Pregled izida postopkov zunajtelesne oploditve obravnavanih parov pokaže, da sta obe metodi priprave semena primerljivi. Izid je primerljiv tudi pri parih s starostjo ženske enako ali višjo od 38 let in koncentracijo semenčic moškega manjšo od 5×10^6/mL. Metoda MF ni primerna za pripravo semena s koncentracijo semenčic manjšo ali enako 1×10^6/mL. Pokaže se morebitna korelacija med metodo mikrofluidike, ki izbere semenčice z manjšim deležem fragmentacije DNK in uspešno zanositvijo žensk starejših od 40 let s slabšimi popravljalni mehanizmi jajčne celice.[A. Habe]20252025-01-22 07:15:19Magistrsko delo/naloga166696sl