Izražanje himernega antigenskega receptorja in membransko vezanih citokinov IL-2 ter IL-15 v celicah NK-92 za imunoterapijo rakaAmon, Špela (Avtor) Fink, Tina (Mentor) CARimunoterapija rakambIL-2Neo-2/15NK-92V zadnjih letih je terapija CAR-T postala ena izmed najbolj obetavnih načinov za zdravljenje rakavih obolenj. Kljub vsem pozitivnim lastnostim ima terapija tudi nekatere pomanjkljivosti, kot so sindrom sproščanja citokinov in nevrotoksični sindrom, največja omejitev pa je omejena učinkovitost pri zdravljenju trdnih tumorjev. Poleg celic T so tudi celice naravne ubijalke pokazale potencial za uporabo v imunoterapiji raka, saj povzročajo manj neželenih učinkov, v magistrskem delu pa smo želeli dodatno izboljšati njihovo aktivnost pri uničevanju tumorskih celic. Z metodami molekularnega kloniranja smo pripravili različne genske konstrukte, s katerimi smo transducirali celično linijo celic naravnih ubijalk NK-92. Tako dobljene celice NK-92 so poleg himernega antigenskega receptorja izražale še Neo-2/15, ki je bil dodan v arhitekturo CAR, ali pa membransko vezan IL-2 v fuziji z α podenoto receptorja IL-2. Pokazali smo, da je rast celic NK-92 odvisna od eksogeno dodanega IL-2, hkrati pa smo ugotovili, da sta rast in proliferacija pri celicah, ki vsebujejo genski zapis za Neo-2/15 ali membransko vezan IL-2, neodvisni od dodanega IL-2. Pokazali smo še, da so celice NK-92, ki izražajo CAR in Neo-2/15 ali mbIL-2/IL2Rα, učinkovite pri ubijanju rakavih celic v okolju brez IL-2. Prav tako proizvajajo več ključnih molekul, kot sta grancim B in IFN-γ, ki igrata pomembno vlogo pri vršenju citotoksičnosti. Rezultati kažejo na to, da so celice CAR-NK-92 z dodatkom Neo-2/15 oz. IL-2 sposobne ne samo preživeti v okolju brez IL-2, kar je značilno za tumorsko mikrookolje, ampak tudi učinkovito delovati proti rakavim celicam.20242024-09-13 07:15:07Magistrsko delo/naloga161632sl