Proučevanje elektroporacije rastlinskih tkiv s pomočjo indikatorja trifenil tetrazolijev klorid (TTC)Primožič, Urša (Avtor) Mahnič-Kalamiza, Samo (Mentor) elektroporacijaTTCablacijaIreverzibilna elektroporacija je proces, kjer z vzpostavitvijo dovolj intenzivnega pulzirajočega električnega polja povzročimo celično smrt. Ireverzibilno elektroporacijo se v kliničnem okolju uporablja za ablacijo (odstranitev) tkiva. Za določanje področja ablacije se uporablja različne metode, ena izmed njih je tudi obarvanje z redoks indikatorjem 2,3,5-trifenil tetrazolijev klorid (TTC). V naši raziskavi smo preverili vplive različnih elektroporacijskih protokolov na velikost področja ireverzibilne elektroporacije in na obarvanje različnih tkiv v področju pod pragom ireverzibilne elektroporacije. Poskuse smo izvedli na rezinah krompirja, črne redkve, bučke in melone. Na vsakem tkivu smo izvedli poskuse pri napetostih 500 V, 1000 V in 1500 V. Poleg tega smo pri vsaki napetosti izvedli poskuse z 8 unipolarnimi pravokotnimi pulzi, enim eksponentno padajočim pulzom in kombinacijo obeh, torej 8 unipolarnih pravokotnih pulzov, katerim je sledil en eksponentno padajoč pulz. Rezine tkiva smo po elektroporaciji potopili v raztopino TTC in po obarvanju analizirali z računalniško analizo posnetkov. Ugotovili smo, da kombinacija 8 unipolarnih pulzov in enega eksponentno padajočega v večini primerov ne povzroči večjega področja ablacije, kot samostojen eksponentno padajoči pulz pri enaki napetosti. Ugotovili smo tudi, da se pri obarvanju tkiva s TTC v nekaterih primerih pojavi temneje obarvano področje okoli področja ablacije. Na podlagi opravljenih raziskav razloga za nastanek temnejšega (intenzivneje obarvanega) področja ne moremo dokončno in nedvoumno pripisati kateremu od spremljajočih pojavov, kot je izguba turgorskega tlaka ali metabolnim procesom.20242024-08-29 08:30:00Magistrsko delo/naloga160475sl