Uporaba kalmodulina za renaturacijo rekombinantnega encimsko neaktivnega mutanta amoditoksina AMerljak, Matevž (Avtor) Križaj, Igor (Mentor) amoditoksinkalmodulinrenaturacijaAmoditoksini (Atx) so sekretorne fosfolipaze tipa A2 (sPLA2) iz strupa modrasa (Vipera ammodytes ammodytes), ki imajo presinaptično nevrotoksično aktivnost, imenovano tudi β-nevrotoksičnost. Navkljub mnogim odkritjem v zadnjih letih mehanizem njihovega delovanja še ni v celoti poznan, prav tako ni pojasnjena vloga encimske aktivnosti Atx v tem procesu. Za namen študija le-te so raziskovalci razvili rekombinantni mutant AtxA(D49S), ki nima encimske aktivnosti. Omenjen mutant pridobivamo iz bakterij, kjer se odlaga v obliki inkluzijskih telesc, zato ga je potrebno zviti v nativno obliko (renaturacija) ter očistiti. Ker je izkoristek tega procesa običajno precej nizek, je bil cilj pričujočega dela izboljšati izkoristek renaturacije z uporabo kalmodulina (CaM), poznanega liganda Atx, v vlogi šaperona. S takšnim postopkom smo uspešno izolirali nativno zvit mutant AtxA(D49S), vendar je dobljeni izkoristek nižji od pričakovanega.20242024-07-02 12:14:52Diplomsko delo/naloga159161sl