Nivo izražanja enolaze pri zorenju in vnetni stimulaciji oligodentrocitov HOGJenko, Manca (Avtor) Pišlar, Anja (Mentor) Horvat, Selena (Komentor) oligodendrocitidiferenciacijaenolazakatepsin Xnevrotrofična aktivnostNevrodegenerativne bolezni predstavljajo pomemben svetovni zdravstveni problem, vendar še nimamo učinkovitih terapij, ki bi upočasnile, zavrle ali preprečile katerokoli od teh bolezni, zato je pridobivanje informacij o molekularnih mehanizmih povezanih s patologijo nevrodegenerativnih bolezni bistvenega pomena. Pri nastanku in razvoju številnih nevrodegenerativnih bolezni imajo pomemebno vlogo tudi oligodendrociti. V magistrski nalogi smo proučevali nivo izražanja izooblik enolaze v oligodendrocitih, saj izooblika γ-enolaze izkazuje nevrotrofičnim dejavnikom podobno delovanje, vendar njena vloga v oligodendrocitih še ni povsem znana. V ta namen smo izbrali celično linijo oligodendrocitov humanega oligodendroglioma (HOG) in z uporabo različnih sestav diferenciacijskih gojišč spodbudili njihovo diferenciacijo, kar se je videlo v celični morfologiji, upadu celične proliferacije in spremembah nivoja izražanja dejavnikov nezrelih in zrelih oligodendrocitov. Pokazali smo, da med diferenciacijo oligodendrocitov pride do α-γ enolaznega preklopa, pri čemer se je povišal nivo celokupne kot tudi aktivne oblike γ-enolaze in znatno zmanjšal nivo α-enolaze, hkrati je razviden tudi upad glikolitične aktivnosti enolaze. Nadalje smo ugotovili, da ima zaviranje katepsina X s spojino AMS36 dodaten vpliv na diferenciacijo celic, saj je spodbudilo rast izrastkov v dolžino in preoblikovanje celic v podolgovat fenotip, kar nakazuje na posredno nevrotrofično vlogo γ-enolaze, ki je substrat katepsina X v možganskih celicah, kar podpira tudi pokazana ko-lokalizacija katepsina X in γ-enolaze v oligodendrocitih HOG. Nato smo s citokinoma dejavnikom tumorske nekroze α (TNF-α) in interferonom γ (IFN-γ) postavili vnetni model poškodovanih oligodendrocitov. Ugotovili smo, da spodbujeno vnetje povzroča smrt celic in upad nivoja izražanja α-enolaze in γ-enolaze v oligodendrocitih ter posledično zaviranje celične proliferacije in diferenciacije. V okviru magistrske naloge smo torej pokazali prisotnost α-γ enolaznega preklopa tekom diferenciacije oligodendrocitov, pri čemer se v diferenciranih celicah HOG poveča nivo izražanja γ-enolaze, za katero je značilno izkazovanje trofične podpore in je uravnavana s proteolitičnim delovanjem katepsina X. Zaradi slednjega bi razvoj spojin, ki bi s spodbujanjem trofične aktivnosti γ-enolaze spodbujale aktivacijo oligodendrocitnih predniških celic in diferenciacijo ter obnovo oligodendrocitov, predstavljal pomemben pristop za preprečevanje in zdravljenje nevrodegenerativnih bolezni.20242024-06-14 14:14:44Magistrsko delo/naloga158516sl