Uropatogenost humanih sevov bakterije Escherichia coli na biomimetičnem in vitro modelu prašičjega urotelijaPredojević, Luka (Avtor) Starčič Erjavec, Marjanca (Mentor) Erdani Kreft, Mateja (Komentor) E. coliuropatogenostvirulentni dejavnikicitokinielektronska mikroskopijaOkužbe sečil so lahko hude, včasih tudi smrtne bolezni, katerih etiološki patogeni so pretežno uropatogeni sevi bakterije Escherichia coli (UPEC). Za raziskovanje patogeneze UPEC je bilo že vzpostavljenih več modelov z manjšimi ali večjimi pomanjkljivostmi. Cilj te disertacije je bil razviti preprost, razmeroma hitro pripravljen in poceni biomimetični in vitro model, ki temelji na celicah normalnega prašičjega urotelija (NPU), ki je genetsko in fiziološko podoben uroteliju človeškega mehurja, ter izvesti osnovne študije patogenosti E. coli. Sprva je bil model testiran z uporabo niza kontrolnih sevov E. coli (J96, 536, SE15 in MG1655), nato pa s človeškimi sevi E. coli, izoliranimi bodisi iz urina bolnikov z okužbami sečil bodisi iz blata zdravih posameznikov. Patogenost posameznih testiranih sevov smo določali na osnovi viabilnosti celic NPU. Za vizualizacijo subceličnih dogodkov smo izvedli presevno in vrstično elektronsko mikroskopijo. Seve smo testirali na prisotnost različnih genov, povezanih z virulenco, filogenetsko skupino, vrsto oligosaharida sredice lipopolisaharida, O-serotip, ugotavljali tip lipopolisaharida, sposobnost tvorbe biofilma ter izvedli statistično analizo možnih korelacijskih razmerij med lastnostmi sevov in učinkom na preživetje celic NPU. Ocenili smo tudi citokinski odziv celic NPU na različne seve E. coli. Rezultati so pokazali, da ima vzpostavljen biomimetični urotelijski model diskriminatorno moč, da razlikuje patogene od nepatogenih sevov E. coli in identificira nove, potencialno patogene seve ter razkrije citokinski odziv urotelijskih celic.[L. Predojević]20242024-04-14 07:15:14Doktorsko delo/naloga155737sl