Vzpostavitev avtomatizirane priprave vzorcev terapevtskih monoklonskih protiteles za kapilarno gelsko elektroforezo v prisotnosti natrijevega dodecilsulfataSmolič, Katarina (Avtor) Podgornik, Aleš (Mentor) Mavri, Jan (Komentor) biološka zdravilaterapevtska monoklonska protitelesakapilarna gelska elektroforezaavtomatizacijaAnalitika terapevtskih monoklonskih protitelesa (mAb) temelji na uporabi širokega spektra analitskih metod. V našem delu smo se osredotočili na pripravo vzorcev z robotskim sistemom TECAN Freedom EVO® 200 na dveh različnih izvedbah (nereducirajoči in reducirajoči pogoji) kapilarne gelske elektroforeze v prisotnosti natrijevega dodecilsulfata (CE-SDS). Naše delo je v prvi fazi temeljilo na optimizaciji izvedbe obeh CE-SDS analiz preko določitve ustreznega načina injiciranja. V nadaljevanju smo nato ocenili uspešnost in ustreznost vzorcev pripravljenih s pomočjo robota v primerjavi s klasično ročno pripravljenimi vzorci. Za konec smo obe izvedbi CE-SDS metode dodatno optimizirali tako, da smo podaljšali rok uporabe reagentov v pladnjih za pufre. Pokazali smo, da način injiciranja nima signifikantnega vpliva na vrednosti spremljanih parametrov obeh izvedb CE-SDS analiz. Opažene razlike lahko pripišemo variabilnosti metod ali delno ročno izvedeni obdelavi rezultatov. Prav tako smo dokazali, da je avtomatizirana priprava vzorcev ekvivalentna klasični ročni pripravi vzorcev, s čimer smo tako potrdili našo glavno hipotezo. Končni rezultat testiranja je tudi potrjena stabilnost vial napolnjenih z SDS-MW gelom (shranjevanje na sobni temperaturi), kot tudi vial napolnjenih z UPW (shranjevanje v hladni sobi na 2-8°C) do enega meseca.20242024-03-05 07:15:18Magistrsko delo/naloga154825sl