Identifikacija mehanizma nastanka stresnih granul v celicah po obdelavi s hladno atmosfersko plazmoKarlek, Anže (Avtor) Rogelj, Boris (Mentor) hladna atmosferska plazmastresne granulekvercetinnatrijev arzenitcelični stresoksidativni streseIF2αHladna atmosferska plazma (HAP) je ioniziran plin s približno sobno temperaturo. HAP izkazuje različne fizikalno-kemične lastnosti, saj tekom pridobivanja HAP nastajajo s reaktivne spojine, nevtralni delci, elektromagnetno polje in UV sevanje. HAP je mogoče uporabiti v različne namene, posvetili pa smo se uporabi v medicini. Do sedaj je znano, da HAP povzroča nastanek stresnih granul (SG) po od eIF2α-odvisni poti, vendar točen mehanizem aktivacije integriranega celične odziva (ISR) s strani HAP še ni poznan. Glede na dosedanje poznavanje delovanja HAP vemo, da se ob delovanju HAP tvorijo kisikove in dušikove reaktivne spojine. Z dodatkom znanega antioksidanta kverceta k celični liniji SH-SY5Y Flp-In mScarletI-G3BP1-Myc, smo preverili vpliv oksidativnega stresa na tvorbo SG ob delovanju HAP. Pri tem smo predvidevali, da kvercetin zavira aktivacijo kinaze HRI, ki je odgovorna za nastanek SG ob prisotnosti oksidativnega stresa. Nastanek in lastnosti SG smo opazovali v celični liniji SH-SY5Y Flp-In mScarletI-G3BP1-Myc, ki ima na protin G3BP1 vezan rdeči fluorescenčni protein mScarletI. Protein G3BP1 je eden izmed proteinov v SG, zato se ob delovanju stresa rekrutira v SG, kar opazujemo s fluorescenčno konfokalnim mikroskopom. HAP smo pridobivali s plazemsko šobo pri konstantnem dotoku argona. Pokazali smo, da z dodatek kvercetina k celicam zmanjša delež celic s stresnimi granulami, hkrati pa vpliva na stresni stimulus HAP. Tako smo potrdili vpletenost kisikovih in dušikovih reaktivnih spojin v tvorbi SG. Vpliv kvercetina na fosforilacijo eIF2α nismo dokazali.20232023-09-26 08:30:01Magistrsko delo/naloga150938sl