Prednosti in slabosti uporabe bakterije Bacillus subtilis kot celične tovarne za produkcijo heterolognih proteinov v industrijiDrinovec, Nika (Avtor) Mandić Mulec, Ines (Mentor) Bacillus subtiliscelična tovarnaheterologni proteinisekrecijske potimanipulacija genomaBacillus subtilis je Gram pozitivna bakterija z velikim potencialom za celično tovarno heterolognih proteinov. Že od prejšnjega stoletja se jo uporablja za proizvodnjo encimov in drugih učinkovin, ima dobro poznan genom in razvita orodja za genetske modifikacije genoma. B. subtilis je zelo dovzetna za sprejem tuje DNK, poleg kromosomske in plazmidne DNK sprejme tudi krajše PCR fragmente. Za spreminjanje genoma uporabljajo tehnike CSM, SSR in CRISPR-Cas9. Ima izjemno prilagodljiv metabolizem, zato lahko raste ne enostavnih in poceni substratih. Izloča velike količine produkta, največ preko sekrecijskih poteh Sec in Tat direktno v medij, zato je postopek čiščenja lažji in cenejši. Prednost uporabe B. subtilis je tudi status GRAS, ne izloča endotoksinov ter eksotoksinov in ne proizvaja inkluzijskih telesc. Poleg prednosti ima tudi nekaj slabosti. Ni sposobna tvoriti disulfidnih vezi, saj so encimi nespecifični in počasni. Največjo težavo predstavljajo encimi proteaze, ki razgradijo nastale heterologne proteine in zmanjšujejo donos proizvodnje. Najbolj znani produkti B. subtilis so humani rastni faktor in industrijski encimi amilaza, laktaza, celulolitični encimi in ksilanaza.20232023-09-03 07:16:27Diplomsko delo/naloga149088sl