Toksični učinki izbranih kovin na razmnoževanje alge Chlamydomonas reinhardtiiLesjak, Neža (Avtor) Eleršek, Tina (Mentor) toksični vplivinhibicija razmnoževanjagostota celicfluorescenca klorofilaEC20EC50arzen(V)selen(VI)mikroalga Chlammydomonas reinhardtiiV okviru diplomske naloge smo preučevali toksične učinke izbranih kovin na razmnoževanje alge Chlammydomonas reinhardtii s pomočjo parametrov, kot so gostota celic, inhibicija razmnoževanja, efektivna koncentracija in fluorescenca. Zastavljeni cilji diplomskega dela so raziskati in primerjati učinek kovin selena(VI) in arzena(V) pri EC20 s pomočjo razlike mediane fluorescence in določiti inhibicijio razmnoževanja alg WT. V prvem sklopu raziskovanja smo celice C. reinhardtii obdelovali z različnimi koncentracijami arzena(V) in selena(VI) v ločenih poskusih. Delo smo opravljali v primerno zaščitenem okolju. Na podlagi smernic OECD 201 smo izvedli test rastne inhibicije na algah, ki je trajal 72 ur. Kulturo alg smo najprej morfološko pregledali s pomočjo mikroskopa in najboljšo kulturo iz knjižnice prenesli v erlenmajerico s TAP medijem ter jo dali na stresalnik v rastno komoro, da so se celice namnožile do pozne eksponentne faze. Vzorce izpostavljene kovinam in kontrolne vzorce smo na vsakih 24 ur prenašali na mikrotitrsko ploščo in s pomočjo pretočnega citometra izmerili fluorescenco in gostoto celic, ki smo jih uporabili za analizo podatkov v drugem sklopu diplomskega dela. Glede na naše rezultate izbrani kovini lahko škodujeta algam v vodnih okoljih. Arzen(V) je strupen za C. reinhardtii že od 7mg/L naprej, pri 48 mg/L pa skoraj popolnoma inhibira rast (95% inhibicija). Selen(VI) pa je strupen za izbrano algo že od 0,2 mg/L naprej, pri 2 mg/L pa povzroča 99% inhibicijo razmnoževanja. Eksperimentalno dobljena EC20 za arzen(V) je 15,4 mg/L, medtem ko je E20 za selen(VI) 0,4 mg/L, kar kaže na večjo toksičnost selena. Pri obdelovanju mešanice mutant s kovinami je bila na podlagi gostote celic in inhibicije ugotovljena manjša občutljivost v primerjavi z divjim tipom C. reinhardtii. Zbrani podatki kažejo na toksičnost izbranih elementov in posledično zbujajočo skrb za okolje.20232023-08-27 07:15:49Diplomsko delo/naloga148589sl