Vpliv imunostimulacije primarne celične kulture epitelnih celic mlečne žleze goveda na izražanje provnetnih citokinovDular, Tea (Avtor) Ogorevc, Jernej (Mentor) pbMECmastitiscelični modeliLPSEscherichia colicitokiniIL-8TNF-alfaqPCRMastitis oz. vnetje mlečne žleze je ena od gospodarsko najpomembnejših bolezni prežvekovalcev za prirejo mleka. Mastitis običajno povzročajo bakterije. Celične kulture lahko služijo kot alternativa študijam na živih živali in predstavljajo in vitro model za preučevanje poteka bolezni, kar je ključno za vzpostavitev uspešnih strategij za preprečevanje mastitisa. V eksperimentalnem delu diplomske naloge smo vzpostavili primarno celično kulturo epitelnih celic mlečne žleze goveda – pbMEC in jo uporabili za preučevanje imunskega odziva ob imunostimulaciji. pbMEC smo vzpostavili na neinvaziven način iz mleka in z imunofluorescenco potrdili prisotnost epitelnih celic. Celice smo imunostimulirali z virulentnim dejavnikom Gram negativnih bakterij LPS ter jih inkubirali 3 in 24 ur. Po pretekli inkubaciji smo izolirali RNA, jo reverzno prepisali v cDNA in z metodo qPCR določili diferenčno izražanje genov za citokina IL-8 in TNF-alfa. Rezultati so pokazali, da se je izražanje IL-8 in TNF-alfa po imunostimulaciji z LPS povečalo, kar kaže na to, da je kultura pbMEC imunokompetentna. Izražanje IL-8 je bilo po 24 urah višje kot po 3 urah, medtem ko je bilo izražanje TNF-alfa višje po 3 urah in je bilo po 24 urah le še nekoliko povečano. Rezultati so skladni z ugotovitvami prejšnjih študij ter kažejo na to, da je kultura pbMEC potencialno uporaben in vitro model za preučevanje imunskega odziva ob mastitisu.20232023-06-23 07:15:14Diplomsko delo/naloga147083sl