Razvoj fluorescenčnega testa za določanje količine ceramid fosfoetanolamina vezanega s holesterolom v lipidnih membranahPirnat, Nika (Avtor) Skočaj, Matej (Mentor) Grundner , Maja (Komentor) parodontalne bolezniceramid fosfoetanolaminbiomarkerfluorescencaParodontalna bolezen je najpogostejša kronična vnetna bolezen pri ljudeh. Najpogostejši obliki sta gingivitis in parodontitis. Gingivitis je zgolj blažja oblika vnetja dlesni, ki pa se lahko razvije v hujšo vnetno obliko, parodontitis. Slednjega spremljajo globoko vnetje, nastanek obzobnih žepov, poškodbe kostnega tkiva in navsezadnje tudi izguba zob. Vnetje in poškodbe pripisujemo predvsem parodontalnim patogenom kot so različne po Gramu negativne bakterije. Te ustvarjajo zobne obloge, imenovane biofilmi, in znatno doprinesejo k razvoju in slabšanju bolezni. V membranah tovrstnih patogenov najdemo sfingolipid ceramid fosfoetanolamin (CPE), ki predstavlja potencialni biomarker (i) za odkrivanje parodontalnih bolezni, (ii) za spremljanje poteka razvoja bolezni in (iii) za spremljanje uspešnosti zdravljenja posameznika. V povezavi z egerolizini, edinstvenimi proteini, ki imajo sposobnost vezave na lipide, predstavlja CPE odlično možnost za razvoj novega načina diagnostike parodontalnih bolezni, saj je v znatni meri prisoten v membranah parodontalnih patogenov, v membranah sesalskih celic pa je skorajda nezaznaven. V magistrski nalogi smo zato poskušali vzpostaviti metodo določanja količine CPE v vzorcih multilamelarnih lipidnih veziklov z namenom razvoja diagnostične metode za spremljanje parodontalne bolezni. Diagnostični test temelji na meritvah fluorescence fluorescenčno označenega proteina egerolizina EryA-mCherry, ki se ob pomoči rekombinantnega proteina PlyB ireverzibilno veže na CPE v membranah umetno pripravljenih veziklov.[N. Pirnat]20232023-04-13 11:42:39Magistrsko delo/naloga145220sl