Primerjava različnih monolitnih ionsko izmenjevalnih kromatografskih kolon za čiščenje plazmidne DNAKralj, Špela (Avtor) Podgornik, Aleš (Mentor) Černigoj, Urh (Komentor) kromatografske tehnikeanionska kromatografijaCIMmonolitimonolitne koloneplazmidna DNAčiščenje plazmidne DNAV magistrskem delu je bilo opravljeno primerjalno testiranje šibkih ionsko izmenjevalnih kromatografskih nosilcev CIMmultus␢ DEAE za čiščenje plazmidne DNA (pDNA). Namen dela je bilo iskanje optimalnega premera pretočnih kanalov znotraj kromatografskega nosilca, ki bi omogočal čiščenje pDNA. Tekom preparativnega kromatografskega čiščenja je pogosto opažen izrazit padec tlaka na koloni, kar lahko vodi v podaljšanje procesa ali uničenje kromatografske kolone. Povečevanje premera pretočnih kanalov vodi v zmanjšano vezavno kapaciteto kolon. Predvidevali smo, da k padcu tlaka prispevata velikost pDNA ter delež izoforme oc. S preučevanjem delovanja kolon z različnimi premeri pretočnih kanalov (2 µm, 3 µm, 6 µm) smo poiskušali določiti dimenzije, ki bi omogočale kromatografsko čiščenje brez izrazitega padca tlaka in ugoden izkoristek čiščenja. Potrdili smo začetno hipotezo, da je za čiščenje pDNA večjih od 7 kbp potrebno uporabljati pretočne kanale s premerom večjim kot 2 µm. Kromatografska kolona s premerom pretočnih kanalov 3 µm ni bila ustrezna. Za čiščenje pDNA večjih od 7 kbp se priporoča uporaba kromatografskih kolon s premerom pretočnih kanalov 6 µm. Potrdili smo vlogo izoforme oc pDNA – ujetje na površino monolita, ki vodi v povečevanje padca tlaka na koloni in znižanje izkoristka.[Š. Kralj]20232023-02-16 14:18:18Magistrsko delo/naloga144364sl